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标题: 请教neurogenesis，brdu的组化问题 [打印本页]

作者: sabrina 时间: 2008-5-21 23:54 标题: 请教neurogenesis，brdu的组化问题

斑竹好，关注斑竹的帖子已经很长时间了，去年一直在注册不知是当时bbs服务器的问题还是我电脑的问题，网页超慢，就没有注册上。今天能顺利注册很开心。在阅读斑竹的帖子或回帖时我收获很多，今天长话短说。想就我目前的实验提几个问题，向斑竹求助。
   1、我做的brdu免组，按protocol上大多都是漂片，但因为brdu的流程相对繁琐，漂片到最后片子几乎就烂了，不能再贴片了。而且我也想请问，漂片最后还做酒精脱水和二甲苯吗？
   2、我现在做的是切片时，就贴片，然后放置过夜，让其牢固。但在实验过程中，总是会有托片，给我的实验造成很大麻烦，这是现在困扰我的最大问题。
   以上问题，请赐教。

作者: shanghainese 时间: 2008-5-22 00:11

引用:

原帖由 sabrina 于 2008-5-21 23:54 发表
1、我做的brdu免组，按protocol上大多都是漂片，但因为brdu的流程相对繁琐，漂片到最后片子几乎就烂了，不能再贴片了。而且我也想请问，漂片最后还做酒精脱水和二甲苯吗？
2、我现在做的是切片时，就贴片，然后放置过夜，让其牢固。但在实验过程中，总是会有托片，给我的实验造成很大麻烦，这是现在困扰我的最大问题。 ...

谢谢您的关注和支持。

1、漂片如果固定好了，30 ~ 40微米的厚片，在染色过程中是不会烂的。漂片最后还得做酒精脱水和二甲苯。不过做酒精脱水和二甲苯之前，要把片子表贴在玻片上并晾干粘牢。

2、脱片问题的解决方法是用防脱载玻片。我以前介绍过，您找一找旧帖子。

作者: sabrina 时间: 2008-5-22 09:46 标题: 请教neurogenesis，brdu的组化问题

您好，感谢斑竹的回复。还我还是有些疑问：
1 我用的就是多聚赖氨酸包被过的片子，仍然脱片。能烦请斑竹把贴片的过程和时间介绍一下吗？
2 斑竹是否做过这方面的实验呢？以您看漂片和贴片那种效果好些呢？
谢谢

作者: shanghainese 时间: 2008-5-22 11:35

用 Superfrost Plus 载玻片。

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