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标题: 请教血管冰冻切片的油红O染色 [打印本页]

作者: xxshining 时间: 2008-6-27 10:41 标题: 请教血管冰冻切片的油红O染色

小鼠主动脉根部OCT包埋后于-70度冰箱保存了近两个月，然后做10um厚的冰冻切片，按照常规的油红O染色步骤：60%异丙醇漂洗，染色30min，60%异丙醇分化，水洗~~~~结果油性笔划的圈染红了，斑块没有任何着色~~~请问是什么原因呢，是不是样品保存过久导致脂质丢失？还是像版主说的用苏丹3会灵敏些？
新手上路，请多指教

作者: ylzhao 时间: 2008-6-28 07:01

根据你所说的处理过程看不出什么问题.
1 切片后使用过固定剂没有?
2 什么固定剂?
3 固定时间? 如果没有固定用固定剂固定试一试.
4 加一张脂肪阳性对照片看油红O染液是否有效,
5 异丙醇漂洗和分化过度阳性也会消失.
6 还有组织-70度保存不太清楚和脂肪染色结果有无关系,-7-保存应该没有问题,要密封保存,才能更好保存组织成分.

作者: xxshining 时间: 2008-6-29 11:07

谢谢版主

切片后使用丙酮固定了10min~~~我再查查是不是固定剂的影响

作者: ylzhao 时间: 2008-6-29 22:57

用甲醛固定比较好.

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