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标题: 请叫各位老师：要开展免疫组化需要些什么仪器和试剂？ [打印本页]

作者: 卢田 时间: 2008-7-11 16:08 标题: 请叫各位老师：要开展免疫组化需要些什么仪器和试剂？

我科要开展免疫组化，但我从来免疫做过，请问各位老师要买些什么试剂和仪器设备？？？

作者: mf_1128 时间: 2008-7-15 10:22

恒温孵箱、高压锅、电磁炉、修复盒，这些可能是必须新添的。
还有好些仪器和设备，可能科室都有，如烤箱、移液器、小玻璃染色缸等；也可能刚开展量少，没必要。如全自动免疫组化染色机等，但如果有条件，一气全部制备齐全那当然好了。
另外，做免疫组化的过程中有很多细节需要注意，建议最好到做得比较成熟的医院去学习一段时间，再回来开展，做起来你将得心应手！
最后，祝愿你一切顺利！

作者: 卢田 时间: 2008-7-15 16:38

非常感谢你的指导。电磁炉可以代替高压锅吗？恒温箱可以代替烤箱吗？学免疫组化要多久可以学会，如果有人教的话，一个礼拜能会吗？

作者: mf_1128 时间: 2008-7-17 09:06

1.电磁炉是用来加热高压锅里的水的，不能代替。但我知道你的意思，你是想问微波炉能否代替高压锅和电磁炉是吗？按理来说是可以的，但目前公认的是高压锅修复比微波炉修复的效果要好，所以最好用高压锅修复，至于电磁炉等加热工具就根据自己情况制备吧。
2.恒温孵箱和烤箱最好分开，毕竟这两者的差异还是挺大的，如温度差异、干湿差异等。
3.通过和你的交谈，大概知道你对免疫组化有一定的了解，如果在去学习之前把免疫原理、方法步骤等等都好好复习一遍，应该上手很快的。建议科室买一本免疫组化的书最好，也方便以后随时看。

作者: fangdang 时间: 2008-7-17 09:14

作者: 卢田 时间: 2008-7-18 09:09 标题: 回复 4# 的帖子

谢谢。我知道了，以后遇到麻烦了还请多指教。谢了。

作者: mf_1128 时间: 2008-7-18 18:25

大家相互学习

作者: nbzhangliang 时间: 2008-10-16 12:34

楼上回答的真仔细啊，学习这种精神

作者: nbzhangliang 时间: 2008-10-16 13:30

我查了下试剂有这些啊：
最重要的是选择好一抗、二抗或者还有三抗，注意抗体的特异性、效价和交叉反应，最好用单抗。
其他常用试剂有：
1、0.01M(pH7.4)的磷酸盐缓冲生理盐水（PBS），稀释抗体和洗片子用；
2、清洁液、纯水，洗玻片用
3、多聚赖氨酸处理载玻片，防止脱片
4、固定液：4%多聚甲醛或冷丙酮等；
5、15%~30%蔗糖，组织脱水用；
6、梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋，或者OCT包埋做冰冻切片；
7、抗原修复液：枸橼酸缓冲液（pH6.0）；
8、活化剂：EDTA或者Triton X-100；
9、1%~10%牛血清清蛋白（BSA）封闭液；
10、H2O2，灭活内源性过氧化物酶；
11、显色液：根据你做的酶来选择，如果是HRP就用DAB，如果是AKP，就用NBT/BCIP，免疫荧光则不需要；
12、50%缓冲甘油封片液。

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