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标题: 求助!脑组织总是掉片,晕掉了! [打印本页]

作者: chanel0503    时间: 2008-8-26 23:41     标题: 求助!脑组织总是掉片,晕掉了!

我做的是尸检片,同批做的还有肺、肝、肾、胃、肠,心脏等,可是这些组织做的片子都非常好,只有脑组织掉片,尤其是延髓,桥脑,小脑还好一点,办法都想尽了,还是掉,快晕掉了!办法有:增加烤片时间、高质量的切片水平、2-3微米,用防脱片玻片捞片等等。实在没辙了,求助各位高手相助!多谢了!
作者: lijie208239    时间: 2008-8-30 16:42

处理过程能说以下吗   我也做过没你说的那吗脆弱吧?
作者: chanel0503    时间: 2008-8-30 20:24     标题: 回复 2# 的帖子

处理过程是在全自动脱水机内进行的,15%甲醛,80%酒精,95%酒精,100%酒精,硬脂酸蜡,纯蜡。和常规切片一起做,常规片和大部分尸检片都很好,只是脑组织掉片!
作者: 冉木1029    时间: 2008-9-2 23:30

??!大哥,应该是4%formalin,75%alcohol,85%alcohol,95% alcohol,95%alcohol,100%alcohol,100%alcohol,xylene,xylene,xylene,wax,wax
作者: 冉木1029    时间: 2008-9-2 23:34

1.首先组织一定要固定的充分;
2.脱水程序要合理,别在无水酒精和二甲苯中时间过长,组织容易脆,尤其是像脑组织;
3.切片质量一定要过关,够薄;
4.烤片要充分65~75度至少要25~30分钟;
作者: 冉木1029    时间: 2008-9-2 23:35

估计十有**是没固定好
作者: chanel0503    时间: 2008-9-3 22:52     标题: 回复 6# 的帖子

你说的几点我都注意到了,4%formalin和10%甲醛只是说法不同而已,我已经工作多年,这点时不会搞错的。
组织时经过充分固定的,有过之而无不及。
请问,与固定后水洗有没有关系?
作者: hello    时间: 2008-9-4 17:19

脑组织做不好是会掉片的,你看跟你的烤片有没有问题.做之前必须60-62度烤一夜.
作者: chanel0503    时间: 2008-9-4 21:24     标题: 回复 8# 的帖子

关于烤片,我先是90度30分钟,然后在60度左右的温箱过夜,结果还是掉!
作者: 邱宾涛    时间: 2008-9-5 00:21

你的载玻片一定要干净。
作者: 邱宾涛    时间: 2008-9-5 00:24

用新配制的poly-l-lysine(中杉金桥订购)浸泡玻片5min,入烤箱60°烤1h,在试试。
作者: chanel0503    时间: 2008-9-5 21:39     标题: 回复 11# 的帖子

您的意思是用多聚赖氨酸进行防脱片处理吧,我也试过,仍然掉片!
作者: huangshuye    时间: 2008-9-22 10:05     标题: 真有那么难吗?

  我想知道你在切脑组织的时候是什么感觉?
软了~~可能是脱水不好,片子很难切下来;
硬了~~可能是浸蜡温度太高,片子也是容易掉的.
  个人见解:因脑组织很软,固定应该不是问题的关键,而是在脱水过程中,脑组织应该比其他组织的时间要短些,特别要注意浸蜡温度,可以把它当作小标本来处理,就像做快检一样.
  






                     以上纯属个人想法,希望以后能多些交流!
              E-Mail:huangshuye2008@163.com
作者: huangshuye    时间: 2008-9-22 10:11     标题: 真有那么难吗?

  我觉得烤片应该也不是问题的关键,我是一般用:75~~10-15min;
  60略高点~~30min.
  我只做过脑组织肿瘤,没做过纯是脑组织的.
  
    (回脑组织总是掉片)
作者: colin    时间: 2008-10-21 11:13

我们一年的尸检量也很大,刚上班的时候脑组织比你掉得还厉害,(最痛苦的一次我从新切了片,脑组织还是全掉了)后来发现其实做脑组织只要自己稍微细心一点,就不是太麻烦的事情了。
     尸检脑组织由于一般都是把整个脑子拿下来,先预固定一般一个月左右再取材后在固定一周,取材取得薄一点。
     冲水我们一般冲一天,脱水程序和浓度和你的差不多,但时间都相应的延长了,我们一般脱水用手工,大概三天搞定。
     切片处理的时候尽量切薄。涂上粘附液。烤片60度一个小时左右。后面染色大家都是大同小异了。我看了看楼主的方法,发现可能烤片上有问题,温度90度是不是烤糊了哦。其他的问题不好说!
作者: 不爱飞的鸟    时间: 2008-10-21 17:43

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