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标题: 免疫组化ki67 [打印本页]

作者: yangwenta    时间: 2009-4-2 21:16     标题: 免疫组化ki67

最近我们做的免疫组化ki67总是不表达!求教??
我们用的两步法,过程都是按照说明书做的!请教各位老师!
作者: dingwei    时间: 2009-4-3 22:04

把所有的步骤写详细
作者: yangwenta    时间: 2009-4-4 22:04     标题: 免疫组化ki67步骤解答

早晨切片,滴加一抗放入温箱过中午大约2小时,取出后滴加二抗放入温箱1小时,取出后加显色剂四分钟,封片。别的抗体都很好,可是ki67总是不表达,请问哪部错啦????谢谢老师!
作者: fangdang    时间: 2009-4-5 21:22

有无做抗原修复?
作者: yangwenta    时间: 2009-4-5 21:28

忘啦!呵呵!从温箱出来抗原修复20分钟!!!
作者: yangwenta    时间: 2009-4-5 21:29

滴加一抗前抗原修复20分钟!
作者: fangdang    时间: 2009-4-7 12:53

做过扁桃体组织了没有?
作者: yangwenta    时间: 2009-4-7 22:32

没有!!那您认为是什么原因??
作者: colin    时间: 2009-4-9 08:53

我们 ki-67 一直做的很好的。
切片脱蜡至水
抗原修复(柠檬酸缓冲液)微波70P15分钟
0.3%过氧化氢 10分钟
一抗 1小时(37度温箱)
二抗试剂盒按步骤做。(迈新)
DAB显色 水洗,复染!封片!
作者: 元始    时间: 2009-4-9 20:25

以前做过,好像都是强阳性
作者: yangwenta    时间: 2009-4-9 22:00

谢谢!我试试!!
作者: colin    时间: 2009-4-15 15:49

引用:
原帖由 元始 于 2009-4-9 20:25 发表
以前做过,好像都是强阳性
没有吧我们做的有时候都是个别细胞表达!KI-67阳性率越高恶性肿瘤可能性越大,一般需要做的都是来辅助良恶性诊断的!
作者: dingwei    时间: 2009-4-15 20:14

个别细胞表达,说明抗原修复温度不够,(柠檬酸缓冲液)微波70P15分钟,不是好办法。热修复最好、最稳定的方法是高压修复。
作者: cz古典古    时间: 2009-4-15 22:50

免疫组化对照---同型对照(
作者: angyang303    时间: 2009-5-10 10:39

我们可是免疫组化比较多 一天200多个  一个技术人员做,还兼做细胞学,所以有时候也会出现这种现象  按标准作出来后 片中无任何着色,包括淋巴细胞,通常是一天中所有Ki-67都这样, 后面分析原因:因为技术员嫌烤片麻烦,自做主张用电烤炉烤片,还辩解说是看着时间的 。。。 总结如下:1、烤片温度过高、过低都不行,温度不能高过80°( 会造成抗原结构破坏)2、实验步骤按照抗体说明书的,修复液尽量选用建议的 ,修复方法个人还是推荐高压锅热修复。3、DAB呈色的时候不要肉眼看出现**才终止,最好有个显微镜观看  4、注意及时过滤你的H染液  

今天下午还有一门考试,前3科考的还不错,希望下午也是这么简单。
作者: 古纯新词    时间: 2009-8-18 16:32

早晨切片,滴加一抗放入温箱过中午大约1.5小时,取出后滴加二抗放入温箱0.5小时,取出后加显色剂四分钟,封片。别的抗体都很好,可是ki67总是不表达,请问哪部错啦????




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