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标题: 中性缓冲福尔马林固定标本的问题 [打印本页]

作者: 茶客 时间: 2009-9-16 19:32 标题: 中性缓冲福尔马林固定标本的问题

10%中性缓冲福尔马林作为固定液固定标本是目前行业内公认的最好的固定液，对样本固定较好，损伤较少，尤其是对分子方面的研究有好处。请问：与非中性福尔马林比较，10%中性缓冲福尔马林到底是怎样达到“对样本固定较好，损伤较少，尤其是对分子方面的研究有好处。”的呢？

作者: 孟红梅 时间: 2009-11-5 14:32

10%中性缓冲福尔马林有缓冲对，使福尔马林较长时间保持在中性PH值7.0，而非中性甲醛没有缓冲对，放置久了甲醛自行分解产生甲酸，而甲酸会影响细胞核的着色，缓冲对是磷酸二氢钠和磷酸氢二钠。看看化学方面的书吧

作者: 6504339 时间: 2009-11-5 16:33

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原帖由茶客于 2009-9-16 19:32 发表
10%中性缓冲福尔马林作为固定液固定标本是目前行业内公认的最好的固定液，对样本固定较好，损伤较少，尤其是对分子方面的研究有好处。请问：与非中性福尔马林比较，10%中性缓冲福尔马林到底是怎样达到“对样本固定较 ...

如果要研究分子方面的最好不要用中性福尔马林固定液，甲醛会与蛋白质发生交联而起固定作用，这样会影响细胞膜的通透性，有时会使大分子抗原丧失其活性，最好用多聚甲醛和戊二醛，既能更好的保存组织细胞的形态结构，又能使蛋白质得以固定。

作者: jiaguotao 时间: 2009-11-12 14:36

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原帖由 6504339 于 2009-11-5 16:33 发表

如果要研究分子方面的最好不要用中性福尔马林固定液，甲醛会与蛋白质发生交联而起固定作用，这样会影响细胞膜的通透性，有时会使大分子抗原丧失其活性，最好用多聚甲醛和戊二醛，既能更好的保存组织细胞的形态 ...

作者: shanghainese 时间: 2009-11-12 14:48

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原帖由 6504339 于 2009-11-5 16:33 发表

如果要研究分子方面的最好不要用中性福尔马林固定液，甲醛会与蛋白质发生交联而起固定作用，这样会影响细胞膜的通透性，有时会使大分子抗原丧失其活性，最好用多聚甲醛和戊二醛，既能更好的保存组织细胞的形态 ...

请问，多聚甲醛和戊二醛固定蛋白质的机制是什么？

作者: 6504339 时间: 2009-11-12 15:33

多聚甲醛固定，能使细胞内的自由氨基基团发生化学交联。当不同的分子发生交联时，形成一网状结构，把细胞的各个结构成分连接起来。

作者: shanghainese 时间: 2009-11-13 13:46

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原帖由 6504339 于 2009-11-12 15:33 发表
多聚甲醛固定，能使细胞内的自由氨基基团发生化学交联。当不同的分子发生交联时，形成一网状结构，把细胞的各个结构成分连接起来。

多聚甲醛固定，能使细胞内的自由氨基基团发生化学交联。
甲醛会与蛋白质发生交联而起固定作用。
他们又有什么区别呢？

作者: shanghainese 时间: 2009-11-13 13:47

多聚甲醛溶解在水里又是什么？

作者: 6504339 时间: 2009-11-13 14:50

引用:

原帖由 shanghainese 于 2009-11-13 13:46 发表

多聚甲醛固定，能使细胞内的自由氨基基团发生化学交联。
甲醛会与蛋白质发生交联而起固定作用。
他们又有什么区别呢？

一个结合的是与蛋白质分子上的基团发生的交联，一个是与游离的自由氨基基团发生交联，
肯定有不同，好比就是从你头上找块头皮屑和从你头上硬生生的扯块头皮的区别

开玩笑哈！

作者: 6504339 时间: 2009-11-13 15:03

引用:

原帖由 shanghainese 于 2009-11-13 13:47 发表
多聚甲醛溶解在水里又是什么？

多聚甲醛是甲醛的低分子聚合物，甲醛单体，溶于水里是多聚甲醛溶液！

作者: shanghainese 时间: 2009-11-14 13:34

多聚甲醛(Paraformaldehyde)又称固体甲醛，是一类线型短链的聚氧甲撑二醇HO(CH2O)nH(式中的n=8-100)混合的粒状或粉状产物，其中含有少量水分和甲醇。这类低聚合度产品是不稳定的聚合物，容易溶解成甲醛溶液。

福尔马林就是甲醛溶液

[ 本帖最后由 shanghainese 于 2009-11-15 00:43 编辑 ]

作者: 6504339 时间: 2009-11-14 21:38

引用:

原帖由 shanghainese 于 2009-11-14 13:34 发表
多聚甲醛(Paraformaldehyde)又称固体甲醛，是一类线型短链的聚氧甲撑二醇HO(CH2O)nH(式中的n=8-100)混合为粒状或粉状产，其中含有少量水分和甲醇。这类低聚合度产品是不稳定的聚合物，容易溶解成甲醛溶液。

福尔马 ...

学习了,又学到知识了!
还有疑问请教老师,既然多聚甲醛的水溶液跟福尔马林的性质是一样的,那为什么我们在实际操作
比如原位杂交的时候都选用的是多聚甲醛固定而非10%的中性福而马林!
查文献的解释就是说多聚甲醛结合是自由氨基!福而马林结合的是蛋白质的氨基!两者水溶液性质相同为什么固定效果确实确实有不同!希望老师能给我们详细说明下!谢谢!

作者: shanghainese 时间: 2009-11-15 00:40

看来您查阅的文献不够

准确。

作者: 6504339 时间: 2009-11-15 19:31

引用:

原帖由 shanghainese 于 2009-11-15 00:40 发表
看来您查阅的文献不够准确。

两者之间有区别是没错的吧，总得有原因吧！

作者: shanghainese 时间: 2009-11-16 14:48

引用:

原帖由 6504339 于 2009-11-15 19:31 发表
两者之间有区别是没错的吧，总得有原因吧！

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