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标题: 求助HE染色问题 [打印本页]

作者: tgq0 时间: 2009-9-20 10:56 标题: 求助HE染色问题

前段时间冰冻切片染色皮肤HE出现着蓝色的不规则影，请大家帮忙分析是什么原因？能否通过石蜡切片染色来克服啊？
同样时间染的正常的图2

[ 本帖最后由 tgq0 于 2009-9-20 11:13 编辑 ]

作者: 6504339 时间: 2009-9-20 22:31

我们切皮肤是按照切脂肪的温度，皮肤的组织皮下组织含有大量结缔组织和脂肪细胞，按照一般组织的温度组织中脂肪很快会融掉，造成组织切片不完整，粘片出现皱褶！

[ 本帖最后由 6504339 于 2009-9-20 22:42 编辑 ]

作者: jiaguotao 时间: 2009-9-21 15:49

哎呀！你看片子厚的！
薄而均匀是前提，后面的才考虑染色！
建议先解决切片厚薄的问题！
请问此片子的厚度多少？

作者: tgq0 时间: 2009-9-21 16:13

感谢上面两位高手指教，我切的温度是-27以下，但是感觉表皮真皮层较厚，各层密度不均匀，容易卷片子，所以我有不少标本切的时候切速不一样，每切完一张，就把摇柄后退个15°左右，这样才相对克服切片不卷的问题，但是确实是存在切片厚薄不均的问题，所以我想做石蜡是不是会好点？

作者: tgq0 时间: 2009-9-21 16:19

我切的是8um，但是这样切有可能不只这个厚度，昨天我试着调了下时间，把苏木素的时间减少到5分钟，盐酸酒精分化4-6秒，感觉好一些，
有人指教说可能是切片的时候片子上粘有其他的粹屑引起的，有可能么，我在染色前都用流水洗涤过的呀，
请问会不会因为我的标本放在甲醛里时间稍长了，引起标本内部酸性物质过多?所以染色的时候非特异结合苏木素了？

作者: scncoyzh 时间: 2009-10-9 23:42

引用:

原帖由 tgq0 于 2009-9-21 16:19 发表
我切的是8um，但是这样切有可能不只这个厚度，昨天我试着调了下时间，把苏木素的时间减少到5分钟，盐酸酒精分化4-6秒，感觉好一些，
有人指教说可能是切片的时候片子上粘有其他的粹屑引起的，有可能么，我在染色前 ...

难道你染色前都不水洗的吗？

作者: 小杰 时间: 2011-9-24 17:31

作者: 侠客 时间: 2011-9-26 21:28

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