标题:
大鼠脑组织石蜡切片的常规HE染色，老掉片
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作者:
muyouzi
时间:
2009-9-28 16:56
标题:
大鼠脑组织石蜡切片的常规HE染色，老掉片
我现在做大鼠脑组织石蜡切片的常规HE染色，老掉片
之前做的步骤：
10%中性福尔马林固定 6 h以上；
75%乙醇 35min
95乙醇Ⅰ 35min
95%乙醇Ⅱ 35min
100%乙醇Ⅰ 25min
100%乙醇Ⅱ 25min
二甲苯Ⅰ 7min
二甲苯Ⅱ 10min
浸蜡Ⅰ(60℃) 1 h
浸蜡Ⅱ 2 h
包埋切片3 μm，60℃烤片
过夜
，之后脱蜡常规HE染色。。。
因为脑样不够了，如果是
脱水不彻底造成的脱片
，那有
补救措施
么？
可以再重新把蜡块融蜡，把脱水的时间延长再重做一遍么？
高手请指点啊，盼回复！！！
作者:
熊成勇
时间:
2009-10-8 18:37
标题:
回复 1# 的帖子
你认为脱水脱好吗
作者:
痞子张
时间:
2009-10-15 21:37
我觉得是可以把蜡块融掉，但是要先脱蜡到酒精然后再回来脱水、透明、浸蜡。
建议：
10%中性福尔马林固定 12h以上；
75%乙醇 1min
95乙醇Ⅰ 1min
95%乙醇Ⅱ 1min
100%乙醇Ⅰ 40min
100%乙醇Ⅱ 40min
二甲苯Ⅰ 15min
二甲苯Ⅱ 15min
浸蜡Ⅰ(60℃) 2 h
浸蜡Ⅱ 3 h
请问各位老师这样做可行吗？？？
期待各位老师指点！！！
[
本帖最后由 痞子张 于 2009-10-15 21:40 编辑
]
作者:
6504339
时间:
2009-10-15 23:24
固定时间太短，我们这边大鼠小鼠组织都 是 在 固定24小时候 取材脱水，脱水时间太短，大鼠时间在低浓度在45min以上，无水1H ！
先用挂胶片试试，如果还掉片才考虑重新脱水，融掉蜡后，放入二甲苯15分钟，在放入无水酒精半小时，水洗至组织发软，再按照脱水过程重新脱水。建议用 挂胶片！
楼上的 方法肯定不 行，处理后的 脑组织切出来的 估计 都 是 粉末了！
作者:
jiaguotao
时间:
2009-10-16 14:10
60度过夜？
60度过夜？
作者:
adriana
时间:
2009-11-6 16:20
脱水没有问题！是烤片的问题！过尤不及
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