标题:
免疫组化查找原因，多谢
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作者:
sdtazjw
时间:
2009-11-15 09:46
标题:
免疫组化查找原因，多谢
我刚开始做免疫组化，一直没有结果，后来观察是在脱水透明封片前还有点，但封片后观察就没了。详细情况如下，多谢
我做的结肠福尔马林固定，蜡块包埋组织，抗原是膜抗原，查阅资料文献，在结肠腺上皮应该表达，抗体也检测没问题。抗原修复按说明书EDTA（说明书是PH9.0，买的是8.0的就凑合着用的。微波煮沸后加入玻片低火9分钟，自然冷却），一抗浓度说明书1：250，也试过1：100，效果没变化。DAB从几分钟到30分钟都试过。苏木素几秒钟，没用盐酸分化。DAB的时候观察可见到被染上色的另一个细胞层，复染后观察，可见到核蓝色，腺上皮细胞膜网格状，颜色不是很深，土**吧，比**深点，但还不是褐色。但是脱水封片后（中性树胶），细胞膜就也变成蓝色的了，背景不深，结构还算比较清楚。我也很奇怪，我连个非特异染色都没有，大体就是这样，不知道说明白了吗，做过几次了，一直没有阳性结果，愁死了。恳请帮助，谢谢
作者:
shanghainese
时间:
2009-11-15 10:59
先找试剂公司联系一下。
作者:
sdtazjw
时间:
2009-11-15 16:14
标题:
回复 2# 的帖子
shang老师您好，您那意思是怀疑一抗有问题吗，可是我检测过啊
作者:
shanghainese
时间:
2009-11-16 14:45
引用:
原帖由
sdtazjw
于 2009-11-15 16:14 发表
shang老师您好，您那意思是怀疑一抗有问题吗，可是我检测过啊
首先要了解您使用的一抗能否用于福尔马林固定的石蜡切片上.
其次,试验里要加入阳性对照片和阴性对照片.
作者:
sdtazjw
时间:
2009-11-16 21:56
标题:
回复 4# 的帖子
多谢指教，我再好好看看，谢谢
作者:
黑色冰冻机
时间:
2009-12-10 21:41
微波煮沸后加入玻片低火9分钟，自然冷却.
这是问题所在，微波煮沸后加入玻片60%火力，9分钟，分三次转，每次间隔1分钟。试试？
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