中华病理技术论坛 - Powered by Discuz! Board

标题: 切片的小皱褶怎么展开 [打印本页]

作者: sprac 时间: 2009-12-2 22:52 标题: 切片的小皱褶怎么展开

皱褶很小，在显微镜下才能够看到，酒精展片等等方法都用了，没啥效果。同一批也有好的，但就这个，表面看不出来，却怎么也切不好。

不知道问题出在哪儿，

作者: sprac 时间: 2009-12-2 23:12

还有啥办法呢

作者: sprac 时间: 2009-12-2 23:13

展片温度都到了50度了，大的皱褶没有，都是这种小的，

作者: kelvindylie 时间: 2009-12-3 09:25

某些蜡块确实很难切，我一般都是从刀片入手，遇到这样比较难切的蜡块就等换新刀片的时候切它，力道要慢而轻，连续切片估计很难有好的效果，只能切一张展一张，耐心一点应该可以的。

作者: ChenRong 时间: 2009-12-3 20:34

第一张像非洲地图，第三张像卫星地图，你厉害的。

第一张看明白了，
1，保证固定和脱水没问题的前提下，问题出在你的切片手法上
2，对自己手法有信心的话，问题在于水温上，过高，来不及展片。
如果是水温的问题，你试试捞免疫组化常用的方法，先在冷水里漂开在放到热水里，这样还不行的话，还是你切片不好。（绕圈子）。
第三张，似乎看得问题和第一张有所不同，最好先染好色的照片上传上来大家再分析。（有点像水温的关系没展开），看图在说。

作者: dingwei 时间: 2009-12-3 22:02

这和组织类型和脱水有关系。
组织与蜡的收缩度不一样，一般是组织收缩小，蜡收缩大引起，原因是脱水时间不够。
解决办法只有在46-47度水中长时间飘着，边上蜡都化了也没关系，只有等全部平整了才能捞起来。

作者: sprac 时间: 2009-12-3 23:19

感谢2位老师，
前面组织处理应该有问题，但这个组织本身不大，小鼠的胰腺，蜡块看上去问题不大，但切成蜡片组织感觉碎裂了，冰箱冷冻，切片时哈气，30%酒精预先展片。都试过了，长时间的浸泡也尝试了，不能解决问题。
丁老师说是脱水不够，我有点担心脱水或二甲苯过度，但记得无水酒精和二甲苯应该都是室温小于1小时的。

作者: sprac 时间: 2009-12-3 23:33

仔细看了一下，估计这种看上去是褶皱的其实是组织碎裂形成的，估计不可能展的开了，只有在切片上下功夫了。

作者: sprac 时间: 2009-12-3 23:35

请大家再帮忙分析一下，还有啥补救的方法，脱水，透明到底有啥问题。

作者: dingwei 时间: 2009-12-4 09:31

脆裂和是皱处理方法是不一样的。
裂去除的办法：1、用5%氨水涂在蜡块切面上切。
2、组织不要过冰。
3、刀要快，片子要薄。

作者: ChenRong 时间: 2009-12-4 18:52

后面两张图是固定和脱水有问题，并且切片有厚薄。（厚薄除组织的问题外，和你的包埋和是否有关，夹不稳）
还有，你的蜡块弄得那么碎，会不会蜡的质量或蜡里二甲苯多了。

作者: sprac 时间: 2009-12-7 21:47

这种情况，组织处理，脱水，透明的时候该注意啥呢，

作者: 临风揽月 时间: 2009-12-13 19:22

最后两张图看上去是组织处理过了。组织不要冻了，快刀，薄片再试试，同意丁老师的意见。

作者: 小杰 时间: 2011-9-24 17:22

学习了！

作者: 侠客 时间: 2011-9-26 21:43

后面那个确实碎裂，鉴定完毕。基本同意丁老师的处理方法。不要冻我觉得除非切厚片，不然切不起来，我是南方的可能室温比较高，我觉得不要冻太冷就可以。

欢迎光临中华病理技术论坛 (http://bbs.zhbljs.com/bbs/)