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肝匀浆测量总胆固醇

肝匀浆测量总胆固醇

我的方法如下:                                            10%肝匀浆的制备
1、称取0.4g,加入0.8mL的4℃生理盐水,匀浆机匀浆,然后向匀浆液中加入3.2ml的氯仿:甲醇(2:1)提取液,充分混匀,4℃过夜
2.13000r/min,4℃,10min离心,离心后溶液分为上、中、下 三层,小心吸取下相,4℃保存,待用。
                                                                                                  总胆固醇的测量

采用中生北控试剂盒和半自动生化分析仪,将样本和工作液加好后发现明显分层,混匀和不混匀测量的结果差异很大,有的甚至是负值。


问题一:提取总胆固醇的方法可行吗?
问题二:工作液和样本明显分层是因为有机相和水相,在测量的时候到底是应该混匀还是不混匀,不混匀的话是吸取有机相还是水相的液体测量?

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