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冰冻脂肪组织如何进行油红O染色?

冰冻脂肪组织如何进行油红O染色?

请教一下:冰冻脂肪组织如何进行油红O染色?

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也准备做这个实验,同问

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油红O(Oil red)染色法
固定方法:10%中性福尔马林液,10%甲醛-钙液
试剂配制:
油红O染色原液:油红O 0.5g,异丙醇(含量98%以上)100ml。充分溶解后作为储存液(染色原液)。临用前取染色原液6ml,加蒸馏水4ml,稀释后静置5-10min过滤,此液保存不能超过2h。
染色步骤:
1、冷冻切片8-15um。
2、蒸馏水稍洗。
3、置于密封的容器内用稀释后的染液滴染或浸染10-15min。
4、用60%乙醇分色。
5、水稍洗。
6、用Harris苏木精或其他苏木精浅染核30s。
7、用自来水或1%磷酸氢二钠溶液中冲洗至变蓝。
8、切片稍干后用甘油明胶封固。
染色结果:
脂肪呈红色,胞核呈蓝色。

改良油红O染色法
固定方法:10%中性福尔马林液,10%甲醛-钙液
试剂配制:
油红O染液:油红O 0.5g,50%酒精100ml。将油红O溶于酒精内,不断搅拌至完全溶解。染液置磨口瓶内保存备用。
染色步骤:
1、冷冻切片厚10-15um,切片干燥后入50%乙醇稍洗。
2、油红O染液浸染8-10min。
3、50%乙醇分色,自来水洗。
4、苏木精复染核,自来水返蓝。
5、甘油明胶封片。
染色结果:
脂肪呈红色,细胞核呈蓝色。
(本观点纯属本人意见!仅供参考!)

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谢谢指导!步骤很详细,决定试试。

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固定方法:10%中性福尔马林液,10%甲醛-钙液


我是直接取材后液氮保存 ,做冰冻切片  能用这种方法染色吗?  谢谢了

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引用:
原帖由 戈壁老狼 于 2012-12-31 13:12 发表
固定方法:10%中性福尔马林液,10%甲醛-钙液


我是直接取材后液氮保存 ,做冰冻切片  能用这种方法染色吗?  谢谢了
可以!
(本观点纯属本人意见!仅供参考!)

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需要二甲苯透明吗

需要二甲苯透明吗

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引用:
原帖由 戈壁老狼 于 2013-1-18 17:26 发表
需要二甲苯透明吗
不需要,蓝化后吹干,甘油明胶封片,千万不可用中性树胶封片。
(本观点纯属本人意见!仅供参考!)

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请教

我想请问做油红的冰冻切片可以用丙酮固定吗? 固定后切片过夜再染色会不会有影响? 还有我在一本书上看到是用60%的异丙醇分化,请问和60%乙醇分化,有区别吗?

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回复 3# 的帖子

甘油明胶要放在温箱里,提前加热

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