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请教一下网染不上色的问题..

请教一下网染不上色的问题..

我们的网染试剂一直都是自己配制的,之前一直都挺稳定的,步骤是0.5%高锰酸钾与0.5%的硫酸1:1混合滴染5分钟,蒸馏水洗,2%草酸1分钟,蒸馏水洗,2%硫酸铁铵,Gordon-Sweets银氨液滴染1分钟,蒸馏水洗,中性甲醛1分钟,蒸馏水洗,核固红染核。前段时间新配了高锰酸钾和硫酸铁铵之后就一直没有上色,基本是 一点颜色都没有的那种。当时怀疑是高锰酸钾或者硫酸铁铵的问题,只是更换这两种试剂之后出现不上色,把这两种试剂又重新配也还是这样的结果。查了 一下书,说不上色有可能是银氨液失效了,也换了新的氨水重新配了银氨液,但是结果还是没有颜色。鉴于这样的情况,实在想不到怎样解决这个问题了,请各位老师指导一下,谢谢!

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回复 1# 的帖子

有没有可能银氨液没有配好

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当时也考虑过是不是我配试剂有问题,后来就让另外同事重配几次,结果也是一样。当时考虑过是不是氨水失效,也重新订氨水回来重配。我们的配制方法参照《临床病理学技术》的。我其实比较偏向于高锰酸钾或者硫酸铁铵是不是有问题,毕竟是换了这两个试剂后出问题,只是科室的前辈说这两个试剂应该不可能过期,所以我就迷茫了。

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回复 3# 的帖子

硫酸铁铵多长时间

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已经有几年了吧,一直都用那个,其实想问一下这些化学试剂可以保存多久的呢?瓶子上面都没有写有效期,然后科室出于节俭原则,一般都要用完才能换。

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看了几遍,方法是正确的,所有的都重新配过的,以前也出来,硫酸铁铵应该不会过期,我们网状纤维染色硫酸铁铵至少有10年以上,都好好的,你再看看试剂和配制方法,试剂特别是硝酸银纯度越高越好,甲醛也要注意,做特染关键是细节的地方,如果你找到问题所在,请发出来大家学习一下,好吧!
安守本分,沉默是金!!!

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将所配制的试剂放置一久再用。
(本观点纯属本人意见!仅供参考!)

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组织固定及时吗?我们老师说,组织固定不好的话,网染是做不出来的呢~还有,您做了阳性对照了吗?甲醛是新鲜的吗?

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后来发现了问题,是因为直接用了固定标本的甲醛,一直没有显色,后来重新单独配了中性甲醛就好了。但是科室的标本的固定液一直是说中性的,不知道为什么不行,后来参考书上说用碳酸钙中和的中性甲醛就显色了,不知道这个是什么原理呢?

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关键可能不在于是否中性,应该是甲醛的还原能力。就是用水配,显色也很好。所以新鲜配才是最重要的,用固定标本的甲醛是出问题的关键。
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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