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体液涂片的制作

体液涂片的制作

[这个贴子最后由dingwei在 2003/07/10 10:13pm 编辑]

                  体液涂片的制作
   体液脱落细胞学是一个方便而实用的病理学检查,传统的涂片方法,由于操作不当,会造成制片质量欠佳,细胞核结构不清,影响阳性细胞检出率。现将我科经验介绍如下:
1、涂片制作方法:(根据送检液体外观不同,三个方法制作)
1.1当送检液体黄色略显混浊(细胞成份多)或淡红色(只含少量红细胞)时可用普通离心涂片法:吸取两试管液体各10毫升,平衡,放入离心机,3000转/分,时间5~10分钟。离心后将试管内液体倒干,倒置于吸水纸上20秒钟,吸去管口剩余液体,然后再用吸管吸取沉淀物涂片。这样做的片子,由于水份少,所以细胞成份多,并且比较集中。
1.2当送检液体较清(细胞成份少),送检量少于50毫升时,可用重复离心法或滤过膜法:细胞离心后倒去上清液,再加入未离心的液体,反复多次,最后吸干剩余液体用吸管吸取沉淀物涂片。这样可以增加细胞的数量。滤过膜法:去除细胞采集器上抽吸部分,将注射器直接连在滤过器上,拔去内芯,在体液内以1:1的比例加入50%的酒精,混合后,倒入注射器内,体液通过滤膜从另一端流出,直至体液停止流动为止。倒去注射器内残留体液,取出滤膜,将滤膜细胞面向上放于刚倒上95%酒精的纸上,用载玻片压在膜上(此时,细胞和滤膜均粘在玻片上),然后去除滤膜,立即固定。
1.3如果送检标本有大量的红细胞,可用50%酒精等量混合后,再用普通离心涂片法制片。结果红细胞被溶解,肿瘤细胞大量增多,细胞形态保存完好。
1.4  涂片的固定:
细胞制成片后,立即放入固定液(95%酒精与甲醇1:1混合)固定。如干燥后再固定的涂片容易造成细胞核退变,核仁不清,核膜不明显,核染色质模糊等现象。
2、讨论:
传统的离心涂片制作,往往倒去上清液后,试管壁上还有大量液体,当沉淀物吸出时,这些液体也跟着被吸出,稀释了细胞,涂片后细胞数量少,细胞分散,而且由于水份多,不能立即固定,细胞核固缩或退变,影响诊断。而细胞含量少的液体,离心的量不可能很多,每次只能检查20ml左右,往往整张涂片只有几只细胞,极容易漏诊。如遇到血性液体时,沉淀物中有大量的红细胞,有时整片涂片都是红细胞,影响了癌细胞的检测率。当在有血的体液内等量加入50%酒精后,红细胞被溶解,而滤膜技术的应用,可以处理大量的液体(在500mL以内),增加了细胞的数量,阅片时省时省力,减少了漏诊率的发生,从而提高了阳性率。95%酒精与甲醇1:1混合固定液,可减少湿片固定时细胞过渡收缩或脱落。湿片固定保正了细胞的原有的形态,核仁明显,核膜及染色质清晰,有利于细胞性质的准确判断。
参考文献:
1. 梁惠珍,吴惠茜. 血性胸腹水涂片制作技术的探讨. 临床与实验病理学杂志,1999;15(5):466
2. Ciesla Marlyn C. Guidos Barbara J. Selvaggi Suzanne M. Cytomorphology of small-cell (neuroendocrine) carcinoma on ThinPrep(R) cytology as compared to conventional smears. Diagnostic Cytopathology, 24(1). January, 2001. 46-52.   
3. Vassilakos. Comparing liquid-based, thin-layer preparation devices: Dr. Vassilakos replies. Journal of Reproductive Medicine, 45(11). November, 2000. 967-968.
4. Linder James. Comparing liquid-based, thin-layer preparation devices. Journal of Reproductive Medicine, 45(11). November, 2000. 966-967.

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体液涂片的制作

[这个贴子最后由dingwei在 2003/07/10 10:17pm 编辑]

湿固定的尿脱落细胞学。

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体液涂片的制作

干燥后再固定的

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您的方法“1.3如果送检标本有大量的红细胞,可用50%酒精等量混合后,再用普通离心涂片法制片。结果红细胞被溶解,肿瘤细胞大量增多,细胞形态保存完好。”我曾试过,50%的酒精混合后,红细胞不但没溶解,反而都凝成了絮状沉淀,离心后半试管的血凝块,洗都洗不掉。您自己试过吗?还是以上过程漏写了什么步骤?
其他几种方法,我再试试看。

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体液涂片的制作

如果送检的胸水血太多了,可先在试管内加半试管的50%酒精,再吸取血性胸水滴加入试管,等酒精变成粉红色就离心,离心后红细胞会变成白色,倒去,吸取底下少量沉淀物涂片,至于试管我们都是一次性的,不洗。

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体液涂片的制作

"细胞制成片后,立即放入固定液(95%酒精与甲醇1:1混合)固定。如干燥后再固定的涂片容易造成细胞核退变,核仁不清,核膜不明显,核染色质模糊等现象"
  dingwei   老师,细胞会脱落吗?固定的时间是多少?我一般是阴干后染色可是习惯了,此法我试试..

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体液涂片的制作

主要是离心后的沉淀水份要吸干。固定半小时。

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体液涂片的制作

丁老师,看过你发表的体液细胞涂片的文章后学到不少东西,但是我也有些疑问:
1.重复离心法会不会造成细胞形态的破坏?
2.血性体液能否用冰醋酸溶解红细胞且可固定有核细胞?
请指教,谢谢!

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体液涂片的制作

引用:
下面引用由zgx2004/01/04 10:38pm 发表的内容:
丁老师,看过你发表的体液细胞涂片的文章后学到不少东西,但是我也有些疑问:
1.重复离心法会不会造成细胞形态的破坏?
2.血性体液能否用冰醋酸溶解红细胞且可固定有核细胞?
请指教,谢谢!
有同感!

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滤膜哪里能买到?

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