fzxd888

由于大部分电镜室都在使用玻璃刀作为切片工具，由于玻璃条也是比较贵的（大约60元/条），如果使用不当，容易造成玻璃的浪费，为了避免玻璃刀不必要的浪费，我们是这样做的：1、在制刀机制作玻璃刀的时候，必须首先调好切割角度，尽量一次性作成两把刀锋好的刀，如果其中一把刀锋不良，则不要抛弃，应把它作为半薄切片刀使用。2、经过超薄切片后的玻璃刀不要轻易丢弃，可再次利用它来做半薄切片，或者用来下一次超薄切片前的切片削整。本人的观点是，能重复利用的尽量重复利用，有时还能节省一部分制刀时间。

lzhwin

除了LZ说的，我还用一些用过的刀来修块，因为本人修块的水平很次，样品的上表面老是修不平，所以就用用旧的刀先将凹凸不平的样品修平，这样的既可以节省好刀的刀刃，还使用好刀对刀的时间大大缩短，风险也变小了。

    不过我发现即使是半薄切片,在制作时如果不注意选择刀刃的话,切出来的片子在光镜下观察也会有很明显的刀痕。不知道LZ有没有这样的情况。可能是因为我切的时候切片选的比较大吧。因为我感觉半薄切片应该切到尽量多的组织为自己的观察以及后续的超薄切片定位作出参考。所以在切片的时候如果刀口变钝会有很明显的感觉：1、在切到快结束的时候切片很容易被样品臂带走。2、切片时明显感觉到样品臂的移动速度不均匀。不知道这个情况是不是于刀口变钝有关。
  
     另外请教一下楼主关于制玻璃刀的经验。我用的是LKB 7800 制刀机，问下怎么才能调整后脚的宽度。资料上说应该控制在大概0.5---1mm间。感觉自己做出来的废刀还是很多的：（    大概因为偶是初学者吧。恳请LZ介绍下经验。

     我只是一个超切的初学者但渴望能很快的提高技术，特别希望能用玻璃刀切出导师的样品。上面说的如果有什么问题肯请LZ斧正！

     我向导师反映是我切片不连续的问题，导师的意思是以后就用钻石刀切吧 好给我压力啊，还要继续练习！！

fzxd888

用超薄切片切过的刀片做半薄切片应该还行的，有时出现刀痕也是难免的，如果只是做定位用，不明显的刀痕应该不会影响，如果想拍照片，则必须用好的刀。至于制刀，还是看您的经验了，LKB 7800 制刀机我没有用过，无法提供信息，抱歉！半薄切片时刀的损伤是比较大的，尽量将标本表面修平整了再切，而且，切片数量不要太多，5-6片就足够了。如果用钻石刀切片，那感觉一定很好的。