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关于电镜标本取材问题

紧急求教版主培养细胞的取材!

最近要做培养细胞的透射电镜样本,经验不足,特向版主求教!
我按以下流程可行吗?步骤是否有遗漏?顺序上是否合理?
培养瓶培养的细胞取材:1、加入胰蛋白酶消化液,让附壁细胞脱壁;2、将细胞悬混液装入玻璃试管,3000转/分,离心10分钟;3、弃去上清液,加入4摄氏度2.5%戊二醛,固定30分钟;3、弃去固定液,加入缓冲液漂洗5分钟,3000转/分,离心10分钟,弃上清,反复3次;4、加入小牛血清,混匀,3000转/分,离心10分钟,弃上清;5、加入2.5%戊二醛,固定1小时。
是否应该在第2步时就加入戊二醛比较好呢?因为离心10分钟,我担心细胞会有形态改变。

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谢谢版主的指点!有人说胰酶消化后的细胞就变圆了,形态不好
可以把培养液倒掉,PBS液涮洗三次后,加入固定液固定30分钟,然后刮取细胞,离心沉淀,加PBS液清洗2次,后加入血清混匀离心,再次加入固定液,大的团块改小即可。
这样细胞形态更好,是否是这样呢?内心很矛盾!请指点!

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