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请教:PAS染色高手

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你好,我单位现开展肾穿工作,PAS一直染色很淡,没有贵单位的颜色鲜艳,雪夫试剂不管是新配的还是旧的,一直都很淡,很头疼,希望有时间可以赐教一下,另外,不知道贵公司的masson三色最后一步是用亮绿还是苯胺蓝染的?我看过香港的,人家最后一步用的是亮绿,我们主任觉得很好,希望可以和他们做的一样,我试了,亮绿如果染的鲜艳的话,丽春红就褪色了,如果想丽春红不退色,亮绿就不能染时间长,也就只绿不亮了,希望有时间可以好好请教一下。望不吝赐教PAS及三色的详细染色步骤。不胜感激。我的邮箱:yuxuewen365@126.com

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我们也是这个问题,两种颜色不好把握,此若彼强,此强彼弱!

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回复 31# 的帖子

PAS染色淡的原因 有可能是因为你的过碘酸时间控制不好
我是这样认为的 过碘酸作为氧化剂 将-c-c-键打开生成醛基是为了更好的跟雪夫试剂结合
然而氧化剂选择过碘酸而不是高锰酸钾或者过氧化氢是因为其不会对已经氧化生成的醛基再进一步的氧化
因此我建议你可以将过碘酸染色15至25分钟左右 这样进行充分氧化 让雪夫试剂更好的着色
masson的话
harris苏木素5分钟 水洗反蓝
丽春红染20分钟以上 不要水洗 直接用0.5%冰醋酸冲洗 再用磷钼酸速洗(这部很关键 是为了固定之前的染色)
加2%亮绿染色10分钟左右 直接用冰醋酸冲洗
最后过无水酒精(时间不要太长)和二甲苯透明

这是我的个人经验 不知道对你有没有帮助 具体时间还要看你们试剂配制的情况 每次使用前都要回温

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