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请教:PAS染色中的头痛问题!

请教:PAS染色中的头痛问题!

        各位老师
                 您们好!向各位请教个问题。这几天配制雪夫试剂一直没有成功。方法是按照书本上的。碱性品红和偏重亚硫酸钠都是新买的。
               Shiff染液:将蒸馏水100ml煮沸后冷至80℃,加入0.5g的碱性品红,冷却后过滤,煮至50℃时加入1N的盐酸10ml,,冷却至25℃左右加入焦亚硫酸钠0.7g,黑暗中储存过夜,加活性碳1g,摇1分钟放置一会后过滤。
              1N盐酸现用现配:92ml水+8ml浓盐酸。
               自己分析了一下可能的原因:1、盐酸浓度不够。2、碱性品红过期。(我们买的是结晶状的,呈淡绿或者说墨绿稍微再淡点) 偏重亚硫酸钠为粉末状,有味道。
              从肾脏病理书上看到可以直接用亚硫酸钠配制,省掉了加盐酸和偏重亚硫酸钠的步骤。 请问各位老师有这样配制过吗?配制过程需要避光吗?迫切希望能够得到各位老师的指导。本人万分感谢 !
Just turst youself!

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配制过程需要避光吗?不需要。

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引用:
原帖由 colin 于 2008-12-1 16:52 发表
        各位老师
                 您们好!向各位请教个问题。这几天配制雪夫试剂一直没有成功。方法是按照书本上的。碱性品红和偏重亚硫酸钠都是新买的。
               Shiff染液:将蒸馏水100ml煮沸后冷至8 ...
  • 储存过夜一定要密封好,不然溶液里的二氧化硫跑了就配不好雪夫试剂。
  • 加活性碳1g,摇1分钟放置一会后过滤后的滤液应该是无色透明。如果显红色说明没配好。
  • 滴一滴无色透明的雪夫试剂到一盆水里。如果水由无色透明慢慢变红,说明雪夫试剂配好了。
  • PAS 染色失败,不仅仅是雪夫试剂没有配好。 碘酸钠失效而氧化不好,无法将乙二醇氧化成乙二醛,也会造成阴性结果。


[ 本帖最后由 shanghainese 于 2008-12-3 01:45 编辑 ]

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Shifft试剂的配置

配置方法是按书本上来的,将200ml蒸馏水加热煮沸后,加入碱性品红,冷却到50摄氏度后加入20ml当量的盐酸,为什么加入盐酸之后溶解不了,成了红色沉淀物。当量盐酸到底怎么配制。

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浓盐酸是12个当量。1:12稀释就成了1当量的盐酸。

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引用:
原帖由 shanghainese 于 2008-12-2 13:36 发表

储存过夜一定要密封好,不然溶液里的二氧化硫跑了就配不好雪夫试剂。加活性碳1g,摇1分钟放置一会后过滤后的滤液应该是无色透明。如果显红色说明没配好。滴一滴无色透明的雪夫试剂到一盆水里。如果水由无 ...
唉又配了两次,照您老说的,可能是我们的盐酸的量的问题;可是有的又是按照摩尔浓度计算也同样能配制成功。想请教一下,当量浓度是不是和摩尔浓度有本质的区别!
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1000ml蒸馏水里加入82.5ml的盐酸即成1N盐酸

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引用:
原帖由 colin 于 2008-12-10 15:10 发表
      唉又配了两次,照您老说的,可能是我们的盐酸的量的问题;可是有的又是按照摩尔浓度计算也同样能配制成功。想请教一下,当量浓度是不是和摩尔浓度有本质的区别!
1当量浓度的盐酸=1摩尔浓度盐酸

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引用:
原帖由 jiangchengzi 于 2008-12-23 19:26 发表
1000ml蒸馏水里加入82.5ml的盐酸即成1N盐酸
您用的是多少浓度的盐酸?

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引用:
原帖由 shanghainese 于 2008-12-24 00:13 发表

您用的是多少浓度的盐酸?
浓盐酸好像都是37%的!
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