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冷冻切片1 000 例制作的体会(转载节选)

冷冻切片1 000 例制作的体会(转载节选)

1 材料与方法
1.1 设备和材料
采用德国产Leica- CM1900 型恒冷切片机; 普通胶水、苏木精染色液、质量浓度为1 %的醇溶性伊红、冰醋酸5 ml+ 质量浓度为10 %的中性甲醛10 ml + 质量浓度为95 %的酒精85 ml混合固定液各100 ml 盛于染色缸中备用。
1.2 方法
1.2.1 取材
将手术中送检的组织按常规取材, 2 ~ 3 mm 厚, 避免不必要的脂肪组织附着, 取材时注意干燥, 遇小组织用干纱布托住。
1.2.2 包埋
包埋头上倒少量普通胶水, 将组织放置于包埋头上, 周围用胶水封住, 然后放在冷冻台上将其冷却待切。对破碎、较小的组织标本采用先放胶水部分冷却后再放上标本进一步冷却待切。大标本可直接放置于包埋头上。
1.2.3 切片
冷冻台上包埋待切的组织经观察, 从周边向中央逐渐变白, 组织中央出现小区未变色时, 即可行组织块修整, 先粗调修后再微调修整。冷冻切片厚度一般为4 ~ 6 μm, 用毛笔展平直接贴附于干净的载玻片上。立即置于混合固定液中1 ~ 2 min。
1.2.4 染色
将已固定的切片用水冲洗后, 放入50 ℃的苏木精染色液中染1 ~ 2 min, 然后取出水洗数秒, 放入60 ℃热水中蓝化, 镜下观察其染色效果( 以细胞核染色情况为控制效果) 。最后置入质量浓度为1 %的醇性伊红液染数秒, 梯度酒精脱水至二甲
苯, 封固切片。
2 结果
2003 年至2005 年经观察, 应用德国产Leica- CM1900 型恒冷切片机制作冰冻切片, 使用一次性日本羽毛切片刀, 切片效果良好, 切片完整, 厚薄均匀无皱折, 结构清晰, 无空泡及空网状形成, 亦无冰晶等现象。经常规染色后层次分明,分辨率良好,无废片脱片等现象。2003 年至2005 年制作用片1 000 例,诊断符合率达96.0 %以上, 均未发生因切片质量问题造成假象而引起误诊或漏诊治的情况。
此文转载于《肿瘤研究与临床》2006 年10 月第18 卷第10 期
作者:仇玲玲 翟梅娟 黄斌黄 雅萍

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