常规病理HE制片技术——注意事项
1、组织包埋时注意“二次加蜡”
包埋操作时具体的注意事项：先取大小合适的不锈钢模型，注入蜡液置于热台上，液面刚好与模型的上缘平齐，不得低于或高于此限。取出包埋盒内的组织，校对正确后用干净的热镊子将所有组织悉数放入模型的底部，待组织与模型内的蜡液充分融合后，按要求排列后迅速移动模型至冷台，至底部石蜡刚开始凝固，用镊子轻压组织数秒，待组织埋平后，迅速盖上包埋盒注上蜡液，约过10 s～15 s，包埋盒与模型周边的蜡液凝固后，再次补充注入少许蜡液，即进行“二次加蜡”，以增加包埋盒的稳固性，防止切片时因包埋盒松动引起切片震颤。注意液面高度不得高于包埋盒上缘，加盖包埋盒时一定要保持其与模型底部平面平行，无前后左右倾斜的现象。用塑料包埋盒包埋组织时，应注意待包埋模型底部石蜡开始凝固后，盖上包埋盒，待其四周凝固后，进行“二次加蜡”。这样做的目的是使得包埋盒与组织蜡块接触更加稳固，减少和防止切片时产生振颤或包埋盒与组织蜡块脱落。另外，还需注意的是二次加蜡不能过满，否则蜡块不能与切片机夹具完全吻合，造成切片时松动震颤，影响切片质量。
2、组织切片时注意“粗修”
首先，把切片工作程序分为两步：预备切片和正式切片，即粗修和细切。其次，每天切片之前应先检查切片机的角度并将其调整固定，即刀座的角度约在10°，夹具的上下二边与刀刃平行，左右二边与刀刃垂直。预备切片和正式切片过程中所有角度均保持一致不得随意变动。
预备切片：应用轮转式切片机（附二档进样装置）装上旧的一次性刀片操作，将蜡块表面多余的石蜡及不平整的组织修去，至组织尽量暴露最大面，用毛刷刷净，重新冷冻以备正式切片。遇有钙化或硬化组织可用5N盐酸对蜡块表面进行软化处理。
正式切片：用毛刷将切片机打扫干净，换上新的一次性刀片准备切片。切片厚度通常规定为4μm，切片的完整性平整性要求组织完整，厚薄均匀，平整无皱，无刀痕。选取平整光滑无污染的切片置入水面，用纱布将载玻片擦拭干净，捞取切片时使切片与载玻片沿长轴方向平行。漂片仪的温水须每日更换，保持清洁，温度范围在45℃～49℃之间。在载玻片上写上正确的号码后迅速放入烘片箱内，烘片箱温度设置为80℃～90℃左右。通常烘烤15min～30min即可染色。
3、切片工具的选择，镊子和毛刷
镊子建议推荐使用口腔科使用的牙科20CM长弯镊，利于切片展片的操作，眼科弯镊太小，操作灵活性低于前者。毛刷建议推荐使用油画笔、水粉笔，普通毛笔松散，容易刺破组织切片，不利于操作。
4、切片粗修时手轮的操作
建议推荐手轮全转，而不是手轮上下半转。手轮上下半转时蜡块不小心容易“啃刀”
5、切片时安全性的操作
切片机一般都配备手轮锁，可以将手轮锁定于任何位置，防止机器闲置期间意外触及手轮，导致人员意外伤害或夹头撞击刀具。更人性化的切片机往往还配备第二手轮锁，手轮把手只能被锁定于最高点，便于在切片过程中随时更换样品或刀具。
无论钢刀架还是一次性刀片架，都应该配有牢固的护刀器，在更换样品或机器闲置的时候技术操作人员一定要养成良好习惯，将护刀器覆盖在刀刃上方，对人员和刀具都是一种保护。好的护刀器必须能安全地覆盖刀刃的全长。
6、切片现场一次性刀片等锐器的存放
安全是基于良好的组织，在一个干净整洁的实验室，是很少有机会发生事故的。标本处理完毕后，应及时消毒工作台面和取材器械。一次性刀片用完后，玻璃制品一旦破损等等，应废弃在标有“锐器”字样的容器内。
7、捞片和提片
捞片的动作是用载玻片将组织切片托起的感觉，容易在玻片上残留多量水份。提片的动作是将载玻片向前上方提拉，将组织切片裱起，这个方法玻片上水份残留很少。
8、烤片和烘片
组织切片放在热台受热上，谓之烤片；带有热源的空间受热，谓之烘片。烤片要求组织切片裱起后先倒置将水份沥干，等组织微微发白后，再放置热台烤片，5-10 min。此法要求组织切片不能带有水份，防治组织切片因带有的水份受热后扩散导致组织散片。烘片时只要将组织切片裱起后，即可竖立插入染色架后置入箱内受热。水份的影响不是太大。
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