九日

1 　取材
1. 1 　新鲜的手术中标本, 忌浸入酒精、甲醛,避免过多的水份,以防组织脱水,冰晶形成和组织变形。避免过多的脂肪组织及坏死组织。
1. 2 　组织块的大小要合适,所有的冷却技术只能驱除组织表面的热,组织的冷却又依赖于组织的大小、厚薄及组织的散热速度。所以最理想的取材大小为1. 5cm ×1. 5cm ,厚2mm ,绝不能超过3mm。
1. 3 　较小的组织或囊壁样组织可在冰冻头上放点胶水。
1. 4 　同一冻头放二块组织时,组织块位置应与刀锋成90°角,以防止二块组织粘在一起,引起皱折。
2 　温度
2. 1 　恒温冰冻切片机昼夜24h 处于备用状态,白天箱温维持在- 25 ℃,冰冻台的温度- 35 ℃～ - 40 ℃,而做快速切片时冻头的温度要达到- 60 ℃,否则组织过软,造成切片皱折。
2. 2 　控制好组织的冷冻时间,一般3～4min。而甲状腺、淋巴结、肝、肾等组织冰冻时间过长则会变脆、易碎〔1〕,一般应控制在2min ;对于子宫肌瘤、纤维组织的冰冻时间也不宜过长,过会使组织变硬,不仅损刀而且组织片会出现裂痕;对于脂肪组织,冰冻时间则要长些,恒温箱的温度最好维持在- 30 ℃为佳。
3 　切片
3. 1 　先要做好准备工作,刀要锋利,提前按在刀架上,并调节合适的角度,防止因刀温而使切片粘连。
3. 2 　要清洁防卷板和调整防卷板的位置,防止污染及切片皱折〔2〕。
3. 4 　切片时用力要均匀,厚度约6～8μm ,切好的组织在干净的玻璃片上粘贴后立刻放入固定液,以防切片中细胞结构模糊。
3. 4 　固定液中有时会发生组织脱落,可采用防脱粘附剂处理过的玻片进行粘贴, 且固定的时间不宜过短, 约1min ,太短也会造成切片脱落。
4 　染色及封固
做一般的HE 染色,冰冻切片的苏木素一般染2～3min ,再封固,做脂肪切片封固时,可用滤纸轻压,拭去油脂再封固。这样做出来的组织切片结构清晰,厚薄均匀、完整,染色分明,有利于正确的诊断。
此文转载于《现代实用医学》　2001 年第13 卷第12 期
作者：陈洁