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         与判断肿瘤预后有关的免疫组化标志物
余英豪  (南京军区福州总医院  福州  350025)
肿瘤标志物是病理学研究的热点之一，当前所涉及的肿瘤标志物种类繁杂，方法多样，结果不一。本文力争从实用性出发，对目前多数医院已能常规开展的免疫组化检测中与
判断肿瘤预后有关的标志物进行综述。
1  肿瘤分期
1．微浸润与假性浸润  癌的微浸润通常指癌浸透基底膜，含基底膜成分的抗体有助于确定基底膜的完整性，两种最常用的抗体是IV型胶原或层黏蛋白(LN)抗体。免疫组化染色显示基底膜缺如或明显断裂可确定有微浸润。在乳腺及前列腺病变中，良性假性浸润性病变与浸润性癌难以区别的情况较为多见。通过特异性肌动蛋白(Actin)抗体标记可以很容易地识别出肌上皮细胞。浸润性小管成分如包绕有肌上皮细胞则多提示良性病变。前列腺组织基底细胞与腔面细胞的区别，现已有几种专一性抗体，如基底细胞表达高分子旦细胞角蛋白，而腔面的细胞表达低分子量细胞角蛋白。基底细胞几乎见于所有良性前列腺增生病例，而不出现
在恶性腺上皮的外周，这些免疫反应特性可用于良恶性前列腺上皮的区别。
1．2  隐匿性微转移  通过免疫组化手段，可以检测出不同肿瘤骨髓或淋巴结的隐匿性微转移，包括结肠癌、前列腺癌、卵巢癌、肺癌、乳腺癌、恶性黑色素瘤及神经母细胞瘤的转移等。除常用的S-100、PSA、HMB45外，最近发现，CyclinD1在癌组织中的高表达对预测头颈部癌隐匿性转移有很大帮助。
2肿瘤相关抗原
    CEA、AFP、T—PSA检测在肿瘤鉴别诊断及其预后的意义已为大家所熟知，在此强调几点：①CEA的表达可分为3型：胞膜或腔面型、脑浆型和胞浆问质混合型，后二者预后差；②一些非肝性肿瘤，如胃肝样腺癌，AFP可呈阳性反应；③新近
研究认为，T—PSA的低表达是预测前列腺癌进展的最重要的
预测因子。下面再介绍几种肿瘤相关抗原。
2．1  肿瘤相关抗原72 (TGA72)  多种恶性上皮性肿瘤表达TGA72，尤其是乳腺癌、卵巢癌和结肠癌。正常上皮细胞、肉瘤、淋巴造血系统肿瘤通常TGA72阴性。TGA72抗体用于乳腺癌的研究较多，其高表达通常与肿瘤体积大、淋巴结转移瘤细胞分化差及高增殖活性有关。
2．2  肿瘤相关抗原(GA733)  编码上皮糖蛋白40，是一种上皮细胞黏附分子(EP-CAM)，对上皮细胞的生长与分化起着重要作用。多种肿瘤可有GA733表达，尤其是乳腺癌、结
肠癌及肺癌等。Kubuschok等采用GA733对非小细胞肺癌手术切除淋巴结中隐匿性微转移灶进行检测，发现隐匿灶的检出是判断总生存率的独立预后因子。结肠癌GA733表达
形式与肿瘤预后有关，细胞膜及细胞浆的表达预后较基膜侧的表达为差。
3 肿瘤细胞增生标志物
    目前广泛采用的两种增殖相关标志物是Ki-67及增殖细胞核抗原(PCNA)。在乳腺癌、前列腺癌、结肠癌、肺癌、肝癌、胃癌和一些淋巴瘤及肉瘤中，Ki-67及PCNA标记指数高
的病人，无病生存率及总生存率明显下降。最近，一种新的增生标志抗体被报道，此抗体(抗repp86)可与增生特异性蛋白(p86)结合，在细胞的S期、G2期及M期均可表达。有研
究表明，抗repp86高表达与子宫内膜癌复发及死亡率增加明显相关。
4 表皮生长因子受体与细胞黏附分子
    表皮生长因子家族包括表皮生长因子受体(EGFR)、HER-2/neu、HER-3及HER-4等。这里主要介绍EGFR及HER-2/neu(c-erbB-2)，并介绍黏附分子CD44。
4．1   EGFR 广泛存在于各种组织中，但主要在上皮细胞上表达，定位于细胞膜或细胞浆。许多肿瘤EGFR的表达与肿瘤进展有关。EGFR阳性的乳腺癌病人预后明显差于EGFR阴性患者，这在ER阴性和无淋巴结转移的乳腺癌中表现得更为明显。EGFR的表达与ER的表达呈负相关，EGFR阳性患者通常对激素疗法不敏感。EGFR和c-erbB-2均阳性的乳
腺癌患者预后最差。同样，EGFR阳性的食管鳞癌思者5年生存率明显下降。
4．2  c-erbB-2  c-erbB-2检测试剂盒1998年获得美国FDA认定，它是唯一由FDA认定的与Herceptin治疗有关可直接用于诊断分析的免疫组化指标。Herceptin是美国Genentech
公司所注册的一株erbB-2蛋白／HER2／neu蛋白单克隆抗体的品牌，其靶细胞即为表达c-erbB-2的癌细胞。它对已发生其他部位转移的乳腺癌的治疗很有帮助。c-erbB-2蛋白过表
达的患者5年生存率为28％，而阴性者5年生存率可达71％。淋巴结转移的乳腺癌c-erbB-2阳性率可明显增高，有淋巴结转移且c-erbB-2蛋白过表达的乳腺癌病人预后极差，
5年生存率仅为3．4％。另据报道，c-erbB-2与EGFR及HER-3在口腔鳞癌中的过表达患者5年生存率亦明显下降。
4．3  CD44  是一种分布广泛的跨膜糖蛋白分子，分CD44s和CD44v两大类。CD44s主要作为透明质酸受体，结合透明质酸后影响肿瘤的生长和转移。而CD44v则主要表达于转
移的肿瘤细胞。李道明等用免疫组化LSAB法检测了42例食管鳞癌CD44v4／5的表达，结果发现，淋巴结转移组的阳性表达率为76．19％(16／21)，而非转移组的阳性率为42．86％(9／12)，两组间有显著性差异。癌巢周边的癌细胞、肌间浸润的癌细胞、有核分裂的癌细胞和癌栓中的癌细胞及浸润脉管壁的癌细胞均呈强阳性表达。张成武等检测了20例正常胃粘膜上皮、43例异型增生和85例胃癌组织CD44v6的表达，结果正常胃粘膜无表达，而异型增生和胃癌  组织阳性率分别为30．2％和74．1％，其表达强度与胃癌浸润深度、淋巴结转移、肿瘤生长方式、静脉和淋巴管侵袭及远处  转移密切相关。以上结果均表明，CD44v的高表达构成了肿瘤细胞的侵袭性与易转移性。
  4．4  CD15是一种细胞粘附分子，因其对霍奇金淋巴瘤 (HD）中的R-S细胞具有良好的标记作用，被认为是HD的重要标志物。除HD的鉴别诊断外，对胃癌、结直肠癌、甲状腺  癌、乳腺癌等肿瘤CD15的表达研究发现，CD15表达随癌细胞分化程度下降、淋巴结转移和临床分期增高而明显增高。认为CDl5的表达是判断肿瘤的发展、预测淋巴结转移和预后的良好指标。免疫电镜观察显示，CD15抗原主要分布于大肠癌细胞浆的界膜、内质网、高尔基体及近细胞核膜处，CD15可能是通过对所结合的铺基构型改变影响和参与肿瘤的形成和转移过程。
  5  抑癌基因与基因产物
  5．1  抑癌基因  报道最多的要属p53基因。P53改变是人  类癌症中最常见的遗传学异常。涉及多种人类肿瘤，包括结肠癌、膀胱癌、肺癌、乳腺癌和其他类型癌、星形细胞癌、白血病、肉瘤和间皮瘤等。其次是Rb基因，许多人类肿瘤可出现Rb的变化。由于抑癌基因蛋白表达与肿瘤病人预后的关系已有大量报道，在此不多赘述。
  5．2  nm23 又称为抗转移癌基因，目前已被广泛应用于乳腺癌、非小细胞肺癌、胃癌、大肠癌、肝癌、喉癌等多种恶性肿瘤的检测。几乎所有的研究都表明，nm23蛋白高表达患者淋巴结转移率相对较低，存活期相对较长。
  6  预测治疗反应
  6．1  ER和PR  检测乳腺癌ER、PR表达能很好地预测患者对激素治疗的反应和预后。ER/PR阳性、c-erbB-2明性的病例对三苯氧胺等激素治疗反应良好，但ER/PR、c-erbB-2三种抗体均阳性患者采用三苯氧胺可能并无意义。因此近期强调将c-erbB-2与ER/PR一起列入乳腺癌标本的常规检测。ER、PR阳性的患者对激素治疗的反应好、预后佳。
  6．2  多药耐药(MDR)  ①P糖蛋白(P-gp)：是一种跨膜蛋白，其耐药机理是药泵作用。P-gp高表达者通常对长春花碱、长春新碱和阿霉素类化疗剂耐药；②DNA拓扑异构酶：分为I型(topo I)和Ⅱ型(topo Ⅱ)。topoI属于喜
  树碱类抗癌药的作用靶，高表达者对这类药物敏感性相对较高。topoⅡ分为α及β两个亚型，其中α亚型较β亚型含有更强的核定位信号。topoⅡ为topoⅡ抑制剂作用靶，增殖期细  胞或肿瘤细胞topoⅡα或β的活性可比静止期细胞或正常细胞高出数十倍以上。当肿瘤细胞topoⅡ表达下降，则产生对topoⅡ抑制剂类化疗药(阿霉素及鬼臼乙甙叉等)发生耐药；③谷胱甘肽S转移酶(GSTa)：高表达者易对顺铂类化疗药产生耐药。以上几种抗体联合检测可给临床提供更多的耐药信息；④其他耐药预测物：乳腺癌c-erbB-2过表达对含有环磷酰胺、氨甲蝶吟和氟腮嘧啶的化疗方案耐药。N-myc表达增强的小细胞肺癌和神经母细胞瘤对化疗缺乏反应并进展快速；⑤bcl-2：耐药机理为抗凋亡作用，高表达者对多数抗癌药物/放射治疗耐受。
              摘自：诊断病理学杂志 2001年4月第8卷第2 期 108-109页