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还是做不出脑切片,请各位老师帮忙!

还是做不出脑切片,请各位老师帮忙!

做大鼠的脑组织的石蜡包埋(海马)
时间70% 2h  80% 2h  90% 2h 95% 2h 100% 过夜 二甲苯 30min (看着透的,直到没有实心了)石蜡  4h
最后结果切得很好,很平整,也没有脆,碎的现象。但是展片时却无法完全展开,组织上的褶皱很多很细,周围的石蜡都展开了。为什么得不到平整的切片?如果展片时间过长就会发现组织发散。

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100%的时间太长了。

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你用二次展片试试,应该能够改善!
(本观点纯属本人意见!仅供参考!)

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用过二次展片,不行的。100%过夜是和本站的九日老师学的,觉得切片时感觉还是很好的,就是展片不好。很是疑惑。石蜡熔点是58-60度。是不是这个原因呢

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100%酒精过夜,是不对的,只能够在低浓度酒精里过夜!
(本观点纯属本人意见!仅供参考!)

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引用:
原帖由 llj19971997 于 2011-5-15 15:25 发表
用过二次展片,不行的。100%过夜是和本站的九日老师学的,觉得切片时感觉还是很好的,就是展片不好。很是疑惑。石蜡熔点是58-60度。是不是这个原因呢
你在北京吗?如果在,我欢迎你拿着脑组织到我们实验室做,真的,只有亲自做一遍才能说得清楚,比如蜡的情况。希望联系。我给你发个“短信息”,告诉你联系方式

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做好一张切片,附加的条件很多,比如石蜡、乙醇和二甲苯使用的次数等等,单纯地说出一个条件恐怕不能适应所有的实验室,只是在特定的条件下才可以,我也从中接受教训,不会再单独介绍某一种经验。
  一切的技术终归落实到做好的切片上,看看做好的片子就囊括了所有的技术,我继续晒晒做好的切片吧。下一步晒晒脑子的片子。

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我刚为你找到首医刘洋老师的文章,你按照做吧,专家的经验绝对正确,祝你成功!

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你的蜡有没有混的二甲苯过多啊,浸的时候用纯蜡

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感觉蜡块是处理得还可以,可能与切片时的手势和快慢有关。先放入冷水(或20%酒精),把皱折用镊子展平后,再放入热水,应该可能解决。
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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