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[讨论]固定后不水洗直接脱水可不可以?

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[讨论]固定后不水洗直接脱水可不可以?

我们以前也是不水洗直接脱水,现在水洗半小时,还没听医生说有什么差别。

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我觉得固定后还是应该水洗,去除固定剂以免影响后续的染色。而且水洗的时间又不要多长,不要因小失大啊!!

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[讨论]固定后不水洗直接脱水可不可以?

我觉得中间的水洗是完全没有必要的,而且是有害的,它降低了组织中的固定液体浓度,使组织不能在脱水过程中,特别是在低浓度的酒精脱水过程中得到同步的充分的继续固定;而且使得组织含水量大增,延长脱水时间。事实上我在实际工作中不仅不水洗,而且喜欢在低浓度酒精(75%)中滴加2-3ml甲醛。而且制片结果好,对免疫组化及特殊染色也没有任何的影响。
染色不良的罪魁祸首其实并不是甲醛,只要固定的时间不超过原则范围,甲醛没有变成甲酸,对于染色其实并没有多大影响的。而且大家往往忽视了一个我认为是比较重要的问题,那就是用来固定的水和配制苏木素染液的水源是否洁净的问题。很多单位出于成本考虑,往往喜欢直接使用自来水,可是自来水中用来洁净水质的化合物含量和混杂于水中的杂质含量往往会直接影响到染色质量。却是一个容易被人忽视的方面。如果染色其他方面的原因可以被排除,怀疑甲醛影响染色质量的话,还不如去怀疑水质。

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[讨论]固定后不水洗直接脱水可不可以?

[这个贴子最后由中威先生在 2003/11/23 11:28pm 编辑]

基本赞成奇刺老师的说法!
水洗主要是考虑HE切片后后期制作免疫组化和特染的影响,如果不是固定时间太长的标本,和HE染色没有大的关系.水洗是最近几年提出来的新概念;江西到现在已经开展了免疫组化的医院也不少,据我了解到目前为止还没有哪家医院在组织固定后用了水洗这个程序.
不否认水洗有它的理论依据,但多数医院为了省事,组织固定后不水洗,对片子的制作没明显影响.但要是固定时间较长的标本,为了避免甲醛的色素沉着影响切片染色,建议水洗。

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[讨论]固定后不水洗直接脱水可不可以?

要说差别,没有。对抗原的影响,不清楚。好象有,以前我们在没有高温抗原修复时,时间放长的蜡块有区别,现在用高温修复后,没什么大差异,至于以后会如果,也不清。不过为了放心,洗总比不洗好,至少洗过的片子不容易脱片。

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我水洗10分钟,

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我用PBS代替蒸馏水配制10%中性甲醛用来固定标本,不水洗。

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不洗可能对苏木素染色有影响把。

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脱水前流水冲洗组织,不是什么新东西,是经历史证明了的必不可少的一步。
不水洗,害无穷。

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