想把冰冻的新鲜组织都切成切片，切完固定再冻，还是切完直接就冻-80呢？

happymercury

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1^# 大中小发表于 2009-11-6 17:36 只看该作者

想把冰冻的新鲜组织都切成切片，切完固定再冻，还是切完直接就冻-80呢？

想把冰冻的新鲜组织都切成切片，以便做免疫组化直接拿来就做，是切完固定后再冻，还是切完直接就冻-80呢？
如果固定，用多聚甲醛好，还是丙酮好呢？
如果不固定，直接冻-80，要注意什么呢？听说从冰箱拿出来之后要先在室温放置一会，会不会造成胞质外渗，结构变化以至于免疫组化结果不可信呢？
固定后冻与直接冻哪种比较好呢？
请不吝赐教，谢谢啦：）

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小钟

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2^# 大中小发表于 2010-5-28 17:56 只看该作者

我们的冰冻切片是切完后就直接冻起来的，而且固定剂是95的酒精
如果固定后再冻细胞就会固缩

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siliang420

中级会员

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3^# 大中小发表于 2010-9-18 20:27 只看该作者

切好后冰冻就可以，用的时候再拿出来固定，我用的是丙酮（4摄氏度）5min

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