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请教冰冻切片的异常现象

请教冰冻切片的异常现象

使用实验材料:大鼠  
部位:脑、脊髓
表现:切片很平整,但一贴片就看到在组织上有小泡,这个小泡就是没有贴上载玻片。其他都很好。

但切肠系膜中的脂肪没有这个现象,还有心肌也没有这个现象。

还发现切大鼠脊髓中病变中的没有这个现象,而正常对照却很明显。感觉和组织的特异性有关。是否含脂类的组织容易出现这个问题?那有什么原因,有何理论依据,我该如何解决。

我学切片半年。但我发现有一个老师干了十多年,水平也很高,他贴片的时候也是会出现这个现象。后来他把板洗干净了,但还是不太好。只能贴片的时候吸片,好像能好些。

请大家帮忙解决一下?

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有人做冰冻切片,将载玻片预冷后再贴片,不知道你是采用哪种方法。其实预冷后再贴片组织不容易贴牢。也容易留下气泡。你发现的问题也可能与贴片没有任何关系。此乃无的放矢,请多包涵。

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片子太厚了

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请教冰冻切片的异常现象

正常现象,因为脑组织大多是固定并脱水后再行冰冻切片, 故而贴片容易有气泡。但也有一些办法减少气泡现象,比如贴片的手法,组织固定、脱水完全等等。

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回复 1# 的帖子

“切片很平整,但一贴片就看到在组织上有小泡,这个小泡就是没有贴上载玻片”
   那些小泡应该是在贴片时被“封闭”在组织与玻片之间的空气。
   不是所有的组织都会出现这种现象,含“胶样物质”多的组织容易出现这种现象,比如甲状腺等。
   一般的组织也会在贴片的过程中“封闭”空气,但因为一般的组织含水分为主,空气被“封闭”之后可以从组织细胞之间的间隙“溜”出去,所以不容易出现空气小泡。
   正常的脊髓的质地软而致密,因为脊髓含有大量的磷脂成分,与脂肪不同,磷脂结构是较为致密的, “封闭”空气之后,空气是跑不出去的。病变的脊髓不容易出现小泡,是因为脊髓病变之后出现变性坏死,脊髓的坏死主要是液化性坏死,液化的磷脂结构破坏,就不能“封闭”空气了,所以气泡就少了。

   要解决正常脊髓组织出现小泡,我有一个小技巧:贴片时别一下子垂直贴向组织,载玻片与组织呈一点角度慢慢向下贴,让组织从一侧依次贴向玻片,其实就是要达到贴片时将空气赶出去的效果。
   但因为每个人的手法会有一点差异,我也不能保证这样操作能绝对杜绝小泡现象,不过应该会有改善的。
   个人观点,仅供参考!

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谢谢王老师及各位同仁。王老师的解释让我茅塞顿开。这个问题我目前基本解决了,不过王老师的解释让我明白为什么出现这个现象。
虽然现在还不能保证所有的切片都不出泡,但总有了一些改进。方法和各位提到的是一样的,在贴片手法上只能使用王老师提到的手法。

   终于完成任务了,谢谢各位的支持

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