花开花落

我想请教一下，我们医院冰冻染色前，要进一下固定液，要浸泡一分钟冰冻切片，请问有什么意义？这样做会有什么帮助呢？发生反应的原理又如何？我以前在的医院冰冻切完了就直接用火烤了，然后直接上苏木！我也曾经试着不进固定液，直接染色！并没有发现有什么区别啊？！不过，为了保险，之后值班都按她们的步骤去做！所以一直心存疑问！哪位高人能解答？多谢了！

siliang420

我汗，你说为什么？？都说是固定液了，当然是固定组织了，拿火烤，反正我是没有听说过，真不知道烤出来那组织还能看么？？？

dingwei

有用火烤的，很早以前的方法是这样，说明这些医院几十年都没有发展。
如果说没有固定和固定了细胞没什么区别，可能是你们方法上还有错误，细胞核都退变了，所以没什么区别。
冰冻切片的正确方法是片子切完后立即固定，不要在空气中干燥，那怕是几秒钟，只有这样，细胞才不会退变，每个细胞核染色质清晰，你可以试一下。

guo_xiao9

噢。丁老师，我一直都是都切完片子后一起固定的。。
看来有待改正噢！

花开花落

哦是吗!我每次还专门先凉干了再进固定液呢!看来我的做法存在很大的问题啊!谢谢了!呵呵

feyzdg81

引用:

原帖由 dingwei 于 2008-10-25 11:06 发表
有用火烤的，很早以前的方法是这样，说明这些医院几十年都没有发展。
如果说没有固定和固定了细胞没什么区别，可能是你们方法上还有错误，细胞核都退变了，所以没什么区别。
冰冻切片的正确方法是片子切完后立即固 ...

丁老师你的观点我很赞同，但是你们医院大都用的是防脱玻片，象我们下面医院只能用普通玻片，如果在稍温的苏木素中染色（缩短染色时间），就很容易造成脱片，这该如何好呢？

dingwei

冰冻切片根本不需要防脱玻片，我们一直用普通玻片，从来不会脱片，而且苏木素根本不需要加温，我们就是室温下1分钟，染色较果非常好。从开始冷冻到染色完成一般只需7 - 10分钟，加热也需要差不多的时间，所以要节省苏木素那几秒钟没有必要。

feyzdg81

你们用什么苏木素啊，染色时间快啊。

feyzdg81

配方怎么样？很想知道，丁老师，可否赐教。

feyzdg81

我们这边用HARRIS 苏木素，一分钟绝对不可能染的上色。