首先,苏木素染色后本来从深浅上就有你说的这个规律。
如果灰暗的的程度影响了观察,我认为很可能有以下原因:
(1)组织固定的时候,固定液pH值太高;解决之道:pH调解在7.2 ~ 7.4就行了,或者换用AAF固定液(有的试验不能用)。
(2)如果使用的是明矾类苏木素,相对明矾的含量来说,苏木素耗用过多(相对减少),也会造成这个现象;解决之道:换用新的苏木素,或者加入少量成熟的干液,然后过滤使用。
(3)分色时间不够,背景干扰了核的观察;适当多分色数秒或数十秒,可能对比度会更好一些。
不知道我解决你的问题没有?
祝好运!