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脱水到透明的问题求救!

脱水到透明的问题求救!

1.10%甲醛固定2天
2.70%酒精                       过夜
3.80%酒精                       2H
4.90%酒精                       2H
5.95%酒精                       2H
6.100%酒精                     2H
7.100%酒精                     2H
8.二甲苯+无水酒精            0.5H
9.二甲苯                          0.5H

我刚开始摸索做切片,组织是肾,大小0.3m3,透明时依照上面的步骤做下来,但每次做下来这几步,组织总是不透明,薄的地方似乎有一些透明区域,但厚的地方颜色反而更深(呈深红色),不知道是什么原因,所以也一直不能往下做,各位老师能不能帮我看看是什么原因?
万分感谢!

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是用的手工脱水?
组织透明时间似乎短了一点?
我们也是手工脱水!
我们用硬脂酸在透明,一般是放在烤箱里面放一晚上,片子还可以!
还有就是组织脱水的时候觉得你的不怎么合理,一般低浓度和高浓度之间处理的时间还是要有一点差别的,但是也不是很大,相对来说那样组织处理的好一点!
组织固定后一定要流水冲洗,以去掉组织里面残留的二甲苯!
二甲苯会影响后来片子的质量,特别是免疫组化!
Just turst youself!

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二甲苯透明时间太短。无水酒精直接进二甲苯就行了,何必再加一道二甲苯+无水酒精。

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