wxhwxh

最近切片老是有问题，大小标本都不能连续切片，就是每张切片老是中断，不知道怎么回事，还有就是切片的组织，老是碎，感觉就像切甲状腺的胶质一样，很碎，胃镜小标本也是这样，求助老师！！
下面是我用的脱水程序：
石蜡熔点58-60°，固定时间足够长，基本上都超过24小时。刀片是莱卡的新刀片。
我们的脱水机是12缸无压力的那种。石蜡温度64°
1.福尔马林固定液2小时（提前固定一天多）
2.75%酒精 2小时
3.85%酒精  2小时
4.95%酒精  2小时
5. 95%酒精 2小时
6.无水酒精 1小时
7.无水酒精 1小时
8二甲苯  0.5小时
9.二甲苯  0.5小时
10.石蜡  0.5小时
11石蜡  1小时
12.石蜡 1.5小时

95的酒精用桶装的那种，经过测量只有90°。在就是因为气味大，开的窗，室内温度估计在零下1-3度


请老师给点意见建议，不胜感激！！

[ 本帖最后由 wxhwxh 于 2012-11-23 10:33 编辑 ]

ChenRong

室温确实比较低了，不知道你的脱水机除了蜡缸有加热的，其他的有没有加热系统，如果没有的话增加无水和二甲苯的时间，还有如果不连片，你可以试试羽毛R35的刀片。

myzh

把两道95的酒精都改为1个小时。

Tony

add beewax into the embeding media to increase adhesion

泡泡泡芙88

引用:

原帖由 ChenRong 于 2012-11-25 13:03 发表
你可以试试羽毛R35的刀片。

同意

泡泡泡芙88

引用:

原帖由 myzh 于 2012-11-25 18:13 发表
把两道95的酒精都改为1个小时。

同感

周小北

梯度酒精95的时间太长改为1小时吧。

dingwei

别把酒精时间缩短，组织脱水没有脱过的概念，只有脱水不够。组织发脆原因是组织内蜡没有充分浸进去。组织脱水过的概念本身就是错误的，不信你们可以把小组织在每道酒精里放10天看看，组织会不会发脆，就是动物肝、子宫肌瘤、癌组织、胃镜我都放过，都不会脆。所以不要用老经验（所谓的经验很有可能会被错误的观念所误导）或老师的说法去做事，自己多动动手，认真观察和思考。
你的问题可能是酒精浓度太低（95%只有90%），温度太低，时间太短。建议95%过夜（每95ml95%酒精内加入无水5ml），无水每道增加至2个小时以上，或无水酒精过夜，都没有问题。

hnzcr

我们这里以前是手工脱水  都是95%酒精过夜的  效果不错

ding76340646

不敢赞同丁老师的观点，的确没有脱水过头的说法，但是也绝对不是因为酒精浓度的问题，是因为现在多数医院的切片方法的问题，现在中国的病理技术很多还是应用七八十年代的老方法，所谓的蜡块冷冻一会拿出来一个刀口修一下再切，这中方法不过脱水效果怎么样，该破碎的组织块还是破碎的，最简单的说，全是血块的标本可能切出一点都不破损的？答案是不能，但同样的组织块换个方法就可以切到一点都不破碎，完完整整的切片，我们这里胃镜的标本95%酒精超声波处理3分钟，无水3分钟，都是一道，片子一点问题都没有就可以说明不是酒精的问题，想片子不破碎，改一下你的切片方法，修完的蜡块放冰水混合物里5分钟再切，要是还破碎你找我，包赔的。实在不明白你电话咨询也可以，鄙人姓丁，电话15948720808.

引用:

原帖由 dingwei 于 2012-11-27 13:41 发表
别把酒精时间缩短，组织脱水没有脱过的概念，只有脱水不够。组织发脆原因是组织内蜡没有充分浸进去。组织脱水过的概念本身就是错误的，不信你们可以把小组织在每道酒精里放10天看看，组织会不会发脆，就是动物肝、子 ...