gfei

求助：我们单位用的DAKO免疫组化仪，有的切片在正常脱水透明封片的前提下会出现以下现象 ：染色模糊，阴阳脸， 整张片子都是白板（内对照都没有表达），请工程师来检修后也没有发现什么机械故障。我们的加样量是100微升，仪器 的水平也没有问题仪器也才买了一年多，常规的维护保养都在做。   
      1)贵单位是否会出现这种现象？     
      2）贵单位对该机器的使用有什么经验，建议？     

     注：现附上染色模糊切片的图片(前三张是子宫内膜-CD138，后两张是乳腺-HER2，之所以放上后两张是为了说明我们的采图系统没有问题，采集CD138因为这次我们上机子宫内膜组织比较多，问题更明显一些)

[ 本帖最后由 gfei 于 2013-8-30 08:29 编辑 ]

dingwei

无论是DAKO免疫组化仪，还是罗氏、LEICA全自动免疫组化仪，都会有这样的现象，主要是玻片的问题。有的玻片在液体加上去后，会收缩成在一起，有的会流向玻片边缘，这在手工加样里也会发现，而机器无法对此类的现象进行处理，也就造成了有的切片区域着色，有的不着色。只有换其他品牌玻片，可能会好一点，但也不可能百分百保证，所以每张切片要有阳性对照。

gfei

罗氏染色仪不是有它的专利液盖膜吗？罗氏染色仪我们在用，但是用的比较少，除了有时候会有机械故障，一般染色都没有问题；DAKO 染色仪配套的冲洗缓冲液不是加了吐温吗 ，目的就是让液体均匀扩散？

dingwei

如果没有阳性对照根本不知道会不会有问题，就是有你可能也发现不了，因为阳性对照会骗你，我们用罗氏染色仪做的免疫组化，阳性对照贴在上面（也就是近贴标签一端），结果阳性对照结果很好，被检组织阴性，从理论上这张免疫组化结果没问题。但这是PQCC的检测片子，结果别人做出来都是3+的，然后罗氏的技术人员说是有这种现象，阳性对照要贴下面。我们照做了，结果我们做出来另一次PQCC片子被检组织3+，阳性对照阴性（不管怎么说被检组织还是阳性的，所以贴下面比贴上面好）。
什么专利液盖膜，什么专利塑料盖片，都解决不了玻片的疏水性。所有机器的缓冲液都加了吐温，只能解决部份问题。

老笨猫

那用亲水的玻片就能解决问题了吗

willfirm

凡是黏附载玻片都是疏水的。