caoliu713

这几天做了一批免疫组化. 大鼠脑部切片.用正常大鼠作为空白对照组.
     一抗浓度80.  双氧水和山羊血清都处理过.其他的步骤也都是常规的那种
     结果出来发现,空白对照组的切片上居然很多阳性细胞.

dingwei

内源性生物素的影响，选择用非生物素试剂盒。

shanghainese

引用:

原帖由 caoliu713 于 2007-10-19 00:48 发表
这几天做了一批免疫组化. 大鼠脑部切片.用正常大鼠作为空白对照组.
     一抗浓度80.  双氧水和山羊血清都处理过.其他的步骤也都是常规的那种
     结果出来发现,空白对照组的切片上居然很多阳性细胞.

没有灌注?

lijie208239

我做是是胸腹水的 也是这样的结果很另人头痛的

柳玉山

不知道你这种被检测的抗原在正常组织中会不会表达，应该看一下相关文献！若是在正常组织中不表达，可能是抗体特异性不好！可以用过量的抗原来做预吸收实验，从而检测抗体的特异性！若是预吸收后仍有染上细胞，则是抗体纯度不高造成的非特异性染色！

shanghainese

引用:

原帖由 柳玉山 于 2007-11-17 11:16 发表
若是预吸收后仍有染上细胞，则是 则是抗体纯度不高造成的非特异性染色！...

不一定。

guoyk

要不就换一下对照实验的片子，就长做的免疫组化试剂有的时候确实也有在不应显色的细胞里显色，要不就是试剂的特异性不强，要不就是内源性生物素的影响。免疫组化的人为因素影响的特大。

冰雪

引用:

原帖由 shanghainese 于 2007-11-17 13:19 发表

不一定。

能具体解释一下吗！谢谢！