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动物肝脏组织切片体会

动物肝脏组织切片体会

肝脏是最容易破碎的组织之一。
我的经验:准备一个盒子(护士们经常用的白色的长方形搪瓷盘,1-1.5寸深的那种,切片前一天加水3/4左右,盖上盖子放冰箱(注一放平,如是风冷冰箱,离出风口远点,免得冷冻时温度降得不均匀,病面不平整。在切片时,现在冰盒里加点水(大约100ml),冰上面盖上纱布。蜡块粗切后修平整后,细切3-5刀,把蜡块放在冰盒的纱布上,室温1小时左右即可。这时开始切片就不会有破碎的问题了。如果还是不行就适当延长一下时间。另外,这样处理的切片在漂片时可能不平整,解决的办法是在低于包埋蜡熔点4-5度(理论值,我一般用40C的,包埋蜡熔点56-58C)的温水里漂片就会展平。还有就是在把蜡块防冰上以前,可先放在温水浴中3-5秒,这样可适当缩短冰上“水化”的时间。

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这样能解决破碎的问题真好。
我做肝脏时避免破碎的经验是一定脱水要干净,透明时肝脏为玻璃样通透,做成切片没有碎裂

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回复 2# 的帖子

能说说你脱水的程序吗?怎样才能脱水干净?

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脱水并没有什么区别,和大小标本一样脱都没有问题,主要是低浓度酒精的浓度与时间必须保证。
动物肝脏切片的关键是蜡块不要冷冻,切的时候只要把蜡块放在冰上5-10秒钟就可以了,甚至可以不放,一点都不会脆。动物肝脏脆是质地引起的。
有的人为了不让组织发脆,把时间缩短为每道30分钟以内,可能切的时候不脆,但切片很容易掉片,说明脱水不充分,并不是真正解决问题的方法。
以下是小鼠肝75%、85%、95%、95%、100%、100%每道2小时脱水后的切片:
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