胃黏膜及食管黏膜组织切片的制备与体会
天津市第三医院病理科（300250）李志
摘要：胃黏膜及食管黏膜内镜活检标本，可供形成病理诊断的形态信息量很少。同时制片也较困难,特别容易发生组织丢失或混入其它别的组织造成污染。有些组织很碎小，在包埋时很难包埋在一个平面上。另外，胃黏膜及食管黏膜内镜活检均属治疗前活检，HE切片制作好坏与否,直接影响病理报告的准确性和及时性，涉及到治疗方案。因此，胃黏膜及食管黏膜内镜活检的取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、染色和封固等每个环节的工作都要重视。
关键词：胃黏膜及食管黏膜组织；切片
胃黏膜及食管黏膜内镜活检标本有针尖大小至米粒大小
不等。检材常取自病变表浅处或边缘处少许组织，可供形成病
理诊断的形态信息量很少。同时制片也较困难,特别容易发生
组织丢失或混入其它别的组织造成污染。有些组织很碎小，在
包埋时很难包埋在一个平面上。另外，胃黏膜及食管黏膜内镜
活检均属治疗前活检，直接涉及到治疗方案，尤以食管、贲门、
胃底黏膜活检的诊断风险更大。H E 切片制作好坏与否,直接
影响病理报告的准确性和及时性[1]。因此，切片制备过程中每
个环节都很关键。
1 材料及方法
1.1 送检将夹取的胃黏膜及食管黏膜内镜标本置于3 mm×
3 mm 纸片上（以免丢失），放于盛有固定液（10%中性福尔马
林）的小容器内。将与申请单相符的联号贴于容器外送检。
1.2 取材将胃黏膜及食管黏膜内镜组织用擦镜纸片包裹
严密,放入病理编号。夹取组织的镊子要清洗干净，以免污染
其它组织。另外，滴少许曙红Y 染液在极小组织上，以防组织
丢失。
1.3 制片过程包括脱水、浸蜡、包埋、切片、染色、封固。一般
情况下，脱水过度容易造成组织过硬、过脆，特别是在高浓度
乙醇和二甲苯中。低浓度乙醇具有强大的穿透力，组织如果在
低浓度乙醇里充分脱水,在高浓度乙醇里只需脱去从低浓度到
高浓度之间的水分,因此,组织在低浓度乙醇中时间延长些,亦
可缩短无水乙醇中脱水时间。时间控制：AF 固定液4~6 h、
95%乙醇(I)12 h、95%乙醇(II)2 h、无水乙醇(I) 30min、无水乙醇
(II) 30min、透明二甲苯(I)20min、透明二甲苯(II) 30min。浸蜡用
的石蜡熔点在58℃左右，浸蜡(I)1h、浸蜡(II)2h。包埋时注意将
镊子用酒精灯稍微加温烧烤后夹取内镜组织，置于包埋蜡最
底面的中央，再用镊子轻压组织, 使其在一平面上，尽量垂直
包埋。组织温度要接近于石蜡的温度。胃黏膜及食管黏膜组织
切片厚度一般不能超过4μm,应间断性连续切片（一张玻片上
可置6～10 张蜡片）可酌情制备白片。切片要求完整、薄、均匀。
展片水温应在43～45℃之间,水温过高切片蜡膜很快熔化不能
制成连续切片,水温过低皱褶展不平。烤片在58～60℃，烤时间
30min 后立即放入二甲苯I 液，金属架和切片的余温可提高二
甲苯温度使脱蜡更彻底。梯度酒精脱蜡后苏木染色3~5min、伊
红染色1min、脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。
2 讨论
胃黏膜及食管黏膜内镜活检标本，一般为粟米大,有的甚
至针尖大,块数较多,对于这些特小的标本应用白色擦净纸包
裹并加入少许伊红使其染上颜色,然后再脱水、透明、浸蜡和包
埋,否则浸蜡后小标本与蜡滴不易辨认。因其体积很小,应尽可
能将所有微小组织全部取材、全部包埋[2]。在取材时,每一标本
取材完毕,必须把取材用镊子冲洗干净,以免互相污染。每一标
本包埋完毕, 必须把包埋用镊子在酒精灯上烧烤绵纸擦净,以
防碎小组织的交叉污染。石蜡切片,要求伸展适度、平整、组织
细胞无伸拉伤,连续性间断切片，尽量多的为镜检提供信息。展
片是否适度与水的温度有关，适宜温度为43～45℃，这样展片
后的切片,肉眼和镜下观察平整、完好、无皱褶、无细胞松散现
象。在实际工作中,展片仪所显示的温度与实际温度还有一定
差异,尤其是仪器使用一段时间后更明显。可用常用温度计测
试水温。取材、标本的固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、染色和封
固等每个环节的工作都会直接影响切片的质量。
参考文献
[1] 龚志锦。病理组织制片和染色技术[M]。上海:上海科学技术出版
社,1994。14。
[2] 吴佩琴,吴春霖。细针吸取物石蜡切片的制作[J]。临床与实验病理
学杂志,2002，18(3):343。
转载于《中国城乡企业卫生》2009 年12 月第6 期（总第134 期）
[ 本帖最后由 九日 于 2012-10-25 00:06 编辑 ]
