antidiseases

我要做小鼠胃的石蜡切片，但是片子总是坏掉，主要表现为切片后组织与周围包埋蜡脱开；烘干片子后发现组织发白，碎裂翘起。恳请前辈们指点迷津。我在脱水浸蜡前会把 胃切成四段，分别放在不同的框内脱水。目前我用的脱水程序如下，我们实验室使用的是莱卡的全自动脱水浸蜡机。
70%酒精 20 min
80%         20
95%         20
95%         20
100%       20
100%       20
二甲苯1   15
二甲苯2    20  
蜡1           20  61度      真空加压交替
蜡2           30  61度      真空加压交替   
蜡3           30  61度      真空加压交替


感谢各位前辈！！！

中威先生

有没有固定?脱水时间太短!
70%酒精 120 min
80%         60
95%         60
95%         60
100%       60
100%       60
二甲苯1   25
二甲苯2    20  
蜡1           10    65度      真空加压交替
蜡2           120  65度      真空加压交替   
蜡3           30    65度      真空加压交替

antidiseases

取胃时我用ＰＦＡ灌洗消化道，然后再ＰＦＡ中过夜固定的。
我尝试一次您给的程序，多谢您的解答！

cz古典古

没有固定好

6504339

脱水时间太短！我们这边小鼠组织脱水浓度都是从50%开始的！

黄树叶

你们大机器只有11个缸吗？   我是搞人体病理的，可能不怎么理解你们的方向，我是觉得固定和脱水都不好，也不知道你们取大组织块大小，如果向碎米大小而已，那脱水大时间应该是可以的，但是如果是大块组织，脱水时间和“二楼”大差不多，70%大不用那么长也行的。  
1.5X1X1cm  就要1个小时左右大时间了。  还有我建议在脱水之前，我觉得应该再放固定液里泡2个小时（石蜡减少1缸，多一缸固定液也可以吗？）。

jiaguotao

前面几位同仁都提到了脱水，很有道理的，这都是常识！我再加一句，浸蜡的时候不要“真空加负压”，组织损伤明显知道吗？！

dingwei

最根本的问题是固定不好，导致组织脱水不佳，对小鼠来说，这样的脱水时间差不多，最主要是不要在ＰＦＡ中过夜，放在10%福尔马林中过夜试一下。

qibaomeimei

取材太厚不好固定。我之前整个胃的做不好 后来把它瓜分了，就挺好的了