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改良Giemsa染色检测幽门螺旋杆菌的配制方法

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下面微波Giemsa法可以用,我认为没有美蓝和甲苯胺蓝法效果好.
微波Giemsa染色法
试剂:
盐酸乙醇液: 38%盐酸0.5ml, 70%乙醇99.5ml。
Giemsa贮备液: 把60ml甘油放入250ml烧瓶中再加Giemsa染料0.75g, 然后放入56~
58℃烤箱内过夜。将染液移出烤箱后趁热加入甲醇40ml,充分混合后棕色瓶内保存。

10%Triton X-100:Triton X-100 10ml,蒸馏水90ml, 液体要充分混合。
Giemsa工作液:Giemsa 贮备液10ml,甲醇1ml,蒸馏水40ml, 10%Triton X-100 4ml。
1%冰醋酸水溶液: 冰醋酸 1ml, 蒸馏水99ml。
微波Giemsa染色法步骤
1.切片脱蜡至蒸馏水。
2.切片盐酸乙醇中液浸10min。
3.水洗5min。
4.蒸馏水洗。
5.切片在Giemsa工作液内经微波炉60W(输出量600W)4min。
6.蒸馏水洗。
7.1%冰醋酸水溶液分化数秒钟。
8.95%乙醇,无水乙醇脱水。
9.二甲苯透明,中性树胶封固。
结果:细菌(幽门螺杆菌)呈蓝色或淡紫色,细胞核呈蓝色,淋巴细胞胞浆呈淡蓝色或紫色。肥大细胞胞浆,嗜酸性粒细胞胞浆颗粒呈红色。红细胞呈橘**。黑色素颗粒蓝黑色或深绿色。

[ 本帖最后由 ylzhao 于 2008-7-24 12:33 编辑 ]

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