rongye_xj

[ 本帖最后由 rongye_xj 于 2009-5-10 21:48 编辑 ]

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处理程序：中性缓冲液固定   3小时
                 70%、80%、95%、95%酒精各一小时
                 100%、100%酒精各45分钟
                  二甲苯（1）、二甲苯（2）各1小时
                  浸蜡三小时



结果：标本软，没有硬度，包埋时浮于蜡上不下沉。切片时组织没有硬度切不下来，切过的蜡块在室温下放置几个小时后组织处凹陷、变干。

回炉处理：二甲苯  30分钟——梯度酒精（高——低）洗脱二甲苯——固定3小时——……（同上程序）

结果：组织干，硬，制片困难，染出的切片如上。


请大家帮忙分析原因。此程序之前处理标本一直很好，近两日出现此现象，跟换了新液体后情况更糟糕。

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我们用的是湖北泰维的和leicaASP300脱水机，之前一直是这样，leica那天跟换了液体后机器就这样了，初步考虑是酒精的问题，再次跟换后问题就没有了，到目前也不明白是怎么回事。湖北泰维的国产机是之前液体量为液体缸的一半，处理的都还是挺好的，leica出了问题后就为防万一也把液体跟换并量加大了，结果…… 所有机器都一样出问题了。过了个周末，它们自己又好了。
我们的组织处理和包埋全是机器，染色封片也是机器。
问题出现后考虑固定的问题了，加大固定液量和时间后整批标本同前。
总结了：应该还是脱水问题。其他都可以排除了。（其实自己还是没有彻底搞明白，只是找不到其他原因了）
谢谢各位老师的指导。