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急!切片不展,会不会是固定的问题?

急!切片不展,会不会是固定的问题?

奇怪,我做人的肝脏切片,固定不充分就是呈现粉红色。是不是你的甲醛有问题?试剂瓶底下是否有很多沉淀?是否将甲醛液的浓度升高一些?我一般都用15—20%。动物组织比较娇嫩,透明可以用氯仿,优点是组织处理时间长一些也不会透明过度。我在学校时老师就是用氯仿处理鼠的组织,效果很好。对于肝脏,我的感觉是透明的终点不好判断(人的,鼠的没有见过,不好瞎说),一般是凭经验。氯仿更换2次,每次2-3小时是足够的。即使过夜也可以。就是石蜡要多更换一次,共需要3次,约60度,每次1小时。

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急!切片不展,会不会是固定的问题?

试剂瓶底下有沉淀说明试剂已经变质,甲醛浓度不够标称浓度。我就吃过亏。这种情况的出现一般是甲醛保存不当,被冰冻所致。这时试剂已经报废,无法补救。反正甲醛也不贵,重新买新的好了。
我没有搞过免疫组化,这些是我搞HE的经验。但是我想市售的甲醛溶液浓度本身就不稳定,为37-40%,配制的试剂浓度只要不是太高应该没有什么影响。而且对于脑组织,很多资料都介绍10%的浓度是肯定不够的,应该是20%。而且你固定的时间比较短,切片又要进行抗原修复,不应该有什么影响。

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