liflit

本人用冰冻切片机进行切片，组织取材7um，之后进行HE染色，大致过程为mayer液——伊红——剃度酒精——二甲苯，然后在显微镜下观察，开始较好，片之颜色较正常，空气中干燥2min后，镜下迅速变黑，无法辨认细胞。
咋回事！！

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[这个贴子最后由liflit在 2004/01/03 07:44pm 编辑]

因为后续实验要从该片上取下所见细胞，所以不能封片，以前有人染过，结果还可以，怎么我染的什么也看不出来。下面是我的染色过程，时间操作的不太严格，影响会很大吗？
100% ethanol - 15 sec
95% ethanol - 15 sec
70% ethanol - 15 sec
Deionized water - 15 sec
Mayer's Hematoxylin - 30 sec
水洗 10 min
Deionized water - rinse (x 2) - 15 sec
70% ethanol - 15 sec
Eosin Y - 5 sec
95% ethanol - 15 sec
95% ethanol - 15 sec
100% ethanol - 15 sec
100% ethanol - 15 sec
Xylenes (to ensure dehydration of the section) - 60 sec
Air-dry for approximately 2 minutes
实际操作中，mayer液时间从大约10秒至30秒均试过，影响不大

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感谢各位帮助，今天试过好多了