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10%中性甲醛5秒，时间太短，甲醛还没有来得及反应，根本没起到固定的作用。
10%中性甲醛5秒——95%乙醇5秒，这样操作的结果是：组织细胞收缩非常明显，比直接用95%乙醇固定引起的细胞收缩更明显。原因：甲醛时间太短没有起到固定作用，只起到组织“浸水”的作用，组织含有游离水的时候用95%固定，细胞收缩是非常明显的。
甲醛是交联型固定剂，也就是要和蛋白质产生化学反应，反应过程本质是得失电子，缩合反应，是需要时间的。
做冰冻有几点要注意：一、取材后一定要把组织用吸水纸吸干表面的游离水后再冻（肺癌组织从手术室下来使一般都是很湿润的）；二、贴片后立即固定，固定时间2分钟（俺们的固定剂因为酒精浓度不高，脱水反应不剧烈，甲醛与苦味酸都是反应型固定剂，要固定充分就需要保证时间）；三、用饱和碳酸锂溶液返兰（用含有苦味酸的固定剂时）；四、切片经脱水透明后封片，不能晾干或吹干封片。
做冰冻需要速度，但不是无限度的快，必须保证质量的基础上快！否则，快就没有任何意义，反而起反作用！
试一试吧！
