九日

体会
试剂配制和浓度确定是有效染色的重要因素, 高碘酸液浓度一般为5%~ 1%, pH 值在3~ 5 之间[ 1] 。对组织进行单一化学染色时, 高碘酸液浓度可适当降低, 以5%为宜; 进行免疫组化和组织化学重复染色时, 因染色过程组织受到一定程度破坏, 高碘酸液浓度应提高至1%。须行PAS染色的标本要新鲜, 疑含有糖原的组织不要水洗, 及时固定。糖原易溶于水, 应避免用水溶性固定液, 宜采用酒精性固定液如Car no y 液, 能较好地保存糖原, 但有使糖原流动到细胞一侧的现象, 一般认为是由于固定剂把细胞内的糖原推向固定剂对组织浸透的方向而造成。其他组织应用中性福尔马林固定为佳。Schiff 液的配制按常规进行[2] , 其质量如何主要取决于碱性品红的质量, 与配制方法、所用器皿的清洁程度及保存方法亦有关[ 1] 。因此, 需采用高质量的碱性品红试剂, 配制时使用的容器、药勺、称药天平与称药纸等必须洁净、无污染。试剂配制后若暴露过久、光照、加热等易使之变红, 与碱性物质接触也可使Schiff 液变红而失效。故笔者建议, Schiff 液应分装在小口砂塞瓶内, 于冷冻室保存, 用时取出一瓶恢复至室温, 使用后置4度保存。沈洪武等[ 3] 通过对比染色发现, 冷冻保存1 年的Schiff 液的染色结果与新鲜配制的染色结果一致。染色时若环境温度较高且高碘酸作用时间长, 可使某些物质成分发生非特异反应, 使结果出现假阳性[ 1] 。因此, 室温较高时可适当缩短反应时间。PAS 染色时需于暗处加盖反应, 染色时间10~ 20 分钟。染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度, SO2 浓度高, 染色时间适当缩短; 环境温度高, 染色时间也应适当缩短, 反之则需适当延长反应时间。染色过程中不能接触伊红, 否则会造成颜色误差。作糖原染色时, 应作消化对照, 即取两张连续切片, 其中一张脱蜡至水后, 用1%淀粉酶或1 9 稀释的唾液于37度消化30分钟, 水洗后与不经消化处理的切片一起置 5%高碘酸液氧化, 如经消化处理的切片染色阴性, 不经消化处理的切片染色阳性, 即可肯定为糖原。
此文转载于《福建医药杂志》2006 年第28 卷第6 期
作者：陈小萍   吴钦穗
作者单位：厦门市第三医院病理科( 361100        福州市第一医院病理科( 350009)

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