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ATP酶染色冰冻切片求教

前段时间我也做过这个染色,也出现了上述两个问题。对于空泡问题,曾经想用异戊烷试试,但是这个小剂量的不好买,而且很危险,所以放弃了,所以空泡问题还是没有解决,只能尽量使组织迅速冷冻,选用好点的片子染色。第二个问题我发现只要注意孵育液现配现用,调准PH值,I型和II型还是不难区分的,关键是IIA和IIB型仍然区分不明显啊。请大师快点现身指点一下吧。

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谢谢楼上的,看来总算遇到比较有经验的了,有些问题我还想请教一下。PH4.2-4.3与PH4.6的预孵液相比在显示效果上有什么不同之处,因为我只用了PH4.6与PH10.5的预孵液,两种方法显示I型与II型的区别都很明显,但是IIA与IIB仍无法区分,请问您是怎么区分IIA与IIB的。还有,我做小鼠腓肠肌染色切片时肌肉中总有空泡,不知道你是怎么避免的。你给的这个邮箱无法接受邮件啊

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