血性体液标本涂片制作方法探讨
韩磊，贾惠英，谢秋红
关键词:体液;细胞学;红细胞
中图分类号:R 361十.3文献标识码:B
文章编号:1001一7399(2010)06一0765一O1
在临床病理细胞学诊断工作中，临床送检的血性体液标本(如血性胸水、腹水、血尿等)涂片作HE染色后，镜下可见较多的红细胞，背景深染成红色，影响结果的观察，如何既去除红细胞，又保持其它细胞形态的完整性，以利于HE或免疫组化标记后的鉴别诊断，很有必要。本文对3种不同处理的血性体液标本进行了比较，现报道如下。
1材料与方法
1. 1材料
江苏省连云港市第二人民医院临床送检的新鲜血性体液标本，每次量>200 ml。
1.2方法
用吸管吸取标本底部液体15 ml人离心管，2000 r/min，离心10 min，倒掉上清液，取沉渣均匀地涂片3张，待半干时入95%乙醇固定10 min，自来水洗1 min x 2次，之后将涂片分3组处理。A组:直接HE染色;;B组:人10%冰醋酸10 min，并轻微摇动，自来水充分洗涤，HE染色;C组:人10%盐酸10 min，并轻微摇动，自来水充分洗涤，HE染色。光镜下观察3组涂片。
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图1 A组:细胞形态完整不变形，核染色好，红细胞较多，背景较红
图2 B组:10%冰醋酸处理后，细胞胞质膨胀，核染色好，红细胞消失约一半，背景浅红
图3 C组:10%盐酸处理后，红细胞几乎消失或淡染，其它各细胞完整不变形，细胞结构清晰，着色鲜艳，背景清晰
2结果
3种不同方法处理的涂片，经镜下阅片比较，A组经HE染色处理后显示:细胞形态完整不变形，核染色好，红细胞较多，背景较红(图1);B组经10%冰醋酸处理后显示:细胞胞质膨胀，核染色好，红细胞消失约一半，背景浅红(图2);C组经10%盐酸处理后显示:红细胞几乎消失或淡染，其它各细胞完整不变形，细胞结构清晰，着色鲜艳，背景清晰(图3)。
3讨论
A组是作者日常工作中，常用的制片染色方法，虽然能够保持细胞形态的完整性，染色结果也比较满意，但是对于血性体液标本，就暴露出这种方法的不足，不能消除红细胞，背景较红，影响结果的观察，给查找癌细胞造成了一定的困难。本实验试图用B组中10%冰醋酸弱酸的特性来消除红细胞，但冰醋酸能使细胞膨胀，仅能消除部分红细胞，背景浅红，仍不能达到满意的效果。在C组中，10%的盐酸处理涂片，可使大部分红细胞迅速裂解，并在洗涤中脱落，使涂片中红细胞几乎完全消失，背景干净，而癌细胞和其它细胞形态完整、不变形，染色结果也鲜艳、清晰，有利于镜下观察，大大提高阳性检出率。同时由于盐酸裂解红细胞的同时既能洗去涂片中的蛋白质成[1]，防止蛋白质聚集在细胞周围而阻止免疫组化试剂进人细胞，又能充分暴露细胞内抗原，这样在做免疫组化标记时既减少了非特异性着色，降低了背景，又增加了特异性和敏感性，提高了阳性率[2]。由此可见，10%盐酸处理血性体液标本的方法成本低，操作简单，效果满意，值得推广。
参考文献:
收稿日期:2010 - 04 - 02
作者单位:江苏省连云港市第二人民医院(西院)病理科，连云港
222023
作者简介:韩磊，男.主管技师。E-mail;hangeda@ 163. com
[1]颜亚辉，郑辉，张革进.血性胸腹水涂片中红细胞的去除方
法LJ].临床与实验病理学杂志，2004,20(6);750.
[2」熊正文，胡海霞，李春光，等.盐酸水解暴露抗原促进组织化学
反应的研究仁J].中国组织化学与细胞化学杂志，1996,5(1);
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