娟子

请教各位高手：
    我采取大鼠肝脏组织，处理步骤如下：处死后立即取肝组织（厚度不超过0.5厘米）于10％中性福尔马林中固定，（固定液量足够，时间超过24小时）；75％酒精过夜、85%/酒精1小时、95％酒精2小时、两道100％酒精时间1.5小时，透明45分钟－1小时。浸蜡两小时，温度约58度。5微米切片，切片时感觉组织很硬，展片时蜡可以展平，但是组织柔软，不能展平且与蜡分离。请问是哪一步出现了问题？
    PS.部分肝组织固定后呈粉红色，会不会是组织固定不好？如果是固定的问题，请问在固定时要特别注意什么问题？  :em14:

娟子

感谢各位不吝赐教。我会试试看的。我的动物模型是化学药物诱发肝癌，但是正常对照组也出现了同样的问题。至于透蜡的温度，因为我还要做免疫组化，所以不知道能不能超过60度。现在我已经更换了两次福尔马林，但是组织还是呈粉红色，不知是不是固定不好所致？还有就是透明时间根据什么来判断？

娟子

[这个贴子最后由娟子在 2004/05/22 10:21am 编辑]

我已经更换了甲醛，但是还是有粉红的现象。试剂瓶底下是有很多沉淀。我这次试用15％的。感谢法医的指教。但是不知道15％的福尔马林会不会浓度太高？