请教关于冰冻切片的固定问题
我目前在做老鼠视网膜的矢状面冰冻切片，由于所需量较大，我们事先将新鲜取出的老鼠眼球用甲醛固定PBS缓冲，然后再根据需要取出做冰冻切片，现在有几个问题
1.今天分别做了几张10个UM 8UM 5UM的冰冻切片，发现片子相当容易脱片，是否是我没有固定的缘故，请问切好的冰冻片是否需要固定液固定，哪种比较好？
2.我发现镜下的细胞结构有些固缩，是否是事先用固定液固定的结果，如果采用新鲜组织的话做冰冻切片的话，又担心视网膜的脱离以及矢状面的位置不正，请问有什么好的方法么？？
谢谢！
