glypican

组织块切大约7mmX3mmX3mm大
用4%多聚甲醛4度固定20小时左右(多长时间合适？在室温还是4度固定？）
1XPBS洗
70%乙醇4度脱水过夜
组织块修成5mmX3mmX2mm大后，
95%乙醇 15min；无水乙醇 15min×2。（时间/浓度梯度是否合适？）
1/2乙醇 1/2 二甲苯，15min；二甲苯 2min。
1/2 二甲苯 1/2 石蜡（52-54oC）30min；石蜡 1.5 hr；石蜡 2.5 hr。(时间是否合适？）
切片厚度6um，
同时处理几个组织块，总有些很脆，切不出片子。
切出的片子展片贴片后，37度烘8小时左右。做HE染色时掉片又是怎么回事？
谢谢各位前辈指教！

glypican

[这个贴子最后由glypican在 2005/05/10 06:22pm 编辑]

   组织块取下来固定后不马上切片的话，我们是在70%乙醇中保存的。（有什么问题吗？）
   脱水时， 无水乙醇是15min，两次
            然后换乙醇和二甲苯的1:1混合物 15min，再换二甲苯透明2min
   另外：我们用的蜡熔点是52-54度左右的，62度烤片不就化了吗？用普通的烘箱可以烤片吗？
   大家帮忙看看整个过程有什么要改进的？