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中性缓冲福马林正确的配方

     国外的配方:40%甲醛100ml,无水磷酸氢二钠6.5g、磷酸二氢钠(1水)4g 、蒸馏水900ml。国内也有很多人使用这配方。这个配方在没有加甲醛前,缓冲液的pH值为7.0左右,但加了甲醛后pH值为6.7左右,因此,需要用当量NaOH来调pH值。
    而按40%甲醛100ml,无水磷酸氢二钠13g、磷酸二氢钠(1水)4g 、蒸馏水900ml配,加甲醛后,pH为7.0。
      到底那个配方正确,我想,既然要中性,而且要缓冲好,可能还是后面这个配方更好一点。
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不清楚, 我想如果容器密封,半年总没问题。
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中性缓冲福马林固定的目的是为了更好地保存抗原和DNA,对HE切片来说,中性缓冲福马林不是好的固定液,酸性福马林固定后颜色更鲜艳。 如果明白了这个道理,就知道应该用什么固定。如果仅仅是做HE切片(如科研,只要看形态),不需要用中性缓冲福马林固定,而常规病理,就应该用中性缓冲福马林。没有加缓冲液是普通10%福马林,也有人称酸性福马林。
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引用:
原帖由 xkj2797xkj 于 2011-7-27 01:16 发表
甲醛原液存放过久,会有白色沉淀—副醛生成,这种溶液中有甲酸产生,使溶液变为酸性。酸性甲醛可影响细胞核着色。
所以是不能用酸性甲醛固定组织的!酸性福马林固定后颜色更鲜艳的说法原则上是不对的!
甲醛原液存放过久(一般要1年以上),才会有白色沉淀—副醛生成。而我们说的酸性福马林固定,一般都是配好后就使用,使用时间也不会太长,不存在有甲酸产生,就是有也是微量。当然如果是长时间固定(如需要固定几年的标本)酸性的确不好。福马林固定精典的配方:AF液、AAF液、Helly液等都是酸性福马林液。酸性福马林起作用的不仅仅是pH,主要是加入酸的固定作用(如冰醋酸、重铬酸)。你可以使用中性和酸性二种固定液固定后的组织,切完片染色一下,做一个对照,看看那个鲜艳就清楚了。
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中性缓冲甲醛固定是针对免疫组化和分子病理说的,并非为了HE切片。现在由于大量的病例都有可能做免疫组化和分子病理,特别是淋巴瘤、乳腺癌、胃癌、软组织等肿瘤,需要这些手段证实或靶向治疗,所以所有都必须使用中性缓冲甲醛固定,因为你事先并不清楚这块组织一定是什么疾病。
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