dingwei

1． 速冻：是冰冻切片的关键，因为只有速冻才能减少组织内的冰晶，最好的办法是将冷冻头放入液氮内冷冻。在液氮里冷冻要注意不要冻过头，只要看到3/4的组织已经冻住就可以了，待冷冻头拿出后刚好全部冻住，否则就会引起组织发脆，或冷冻头与组织分离。
2． 固定：切片后应立即放入甲醇中固定，不能等切片干后再固定，这样容易造成细胞退变。固定液有很多，经我们实践后发现甲醇作用快，收缩小，染色较清晰，是冰冻切片最理想的固定液。
3． 包埋剂：可用普通胶水代替，但要加入适量的水。太稀了，容易损伤切片刀；太稠了，粘在切片上不容易洗掉,影响切片的质量。
4． 冰冻用切片刀一定要磨快，并且要磨直，否则切出的片子就不平整。
5． 组织发脆后可等几分钟后再切，也可用手在组织上摸几下，如果用手摸，最好戴手套，或用玻片间的纸夹在手与组织之间，以防感染。
冷冻室的温度冬天一般设在19℃左右，夏天设在22℃左右。

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能，如果是马上做冰冻切片，只要将组织浸入液氮中，不时拿出看一下（5-15秒），只要3/4冻住了就可以了，不然会过头。不过过头关系也不大，只要复温就可以了。