求巴氏染色
巴氏染色法:
1、 涂片固定
2、 水洗
3、 苏木素染色2-5分钟
4、 水洗
5、 分化
6、 水洗,蓝化
7、 80%酒精脱水
8、 95%酒精脱水
9、 桔黄G6染30秒
10、95%酒精迅速洗涤二、三次
11、在EA36中染2-3分钟,至胞浆着色鲜艳为止
12、95%酒精迅速洗涤二、三次,洗去多余的颜色
13、无水酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。
桔黄G6: 桔黄G 0.5克溶于5 ml 蒸馏水中,加入纯酒精100 ml,然后加磷钨酸0.015克,用时过滤。
EA36 : 是三种染料配合而成。(不可多配,不能久置)
淡绿: 0.5克加入95%酒精500 ml
俾士麦棕: 0.5克加入95%酒精100 ml
醇溶性依红:2.5克加入95%酒精500 ml
三种染料不易溶解(久置也会出现沉淀),需水浴加热溶解。也可用先溶于5 ml 蒸馏水中,再加入95 ml的无水酒精。
配合方法:
淡绿液: 45 ml
俾士麦棕液: 10 ml
醇溶性依红液: 45 ml
混合后加磷钨酸0.2克,再加碳酸锂饱和溶液一滴。