引用:
原帖由 白杨小小 于 2007-11-21 21:09 发表
我是做小鼠脑组织冰冻切片,多聚甲醛固定,一抗是在核内表达的转录因子,该抗体说明书要求用0.3%PBS/triton 稀释抗体,可是片子背景很深,胞浆染色而不是胞核染色,不知道什么原因,请赐教!
你的切片不厚(<=10u),没有必要用triton,一般的PBS就可以了。
另外你仔细看一下一抗说明书,能否用于甲醛固定的组织切[片。如果说能,那就要怀疑一抗的特异性是否有问题。 你说背景很深,那么isotype control 如何?